HiMedia MV254-500G HiVeg среда для антибиотического анализа №13

Сухая питательная среда HiMedia MV254-500G HiVeg для антибиотического анализа №13 с растительными пептонами и конечным pH 5,6 ± 0,2. Применяется для турбидиметрического анализа противогрибковых препаратов, включая кандицидин, с использованием Saccharomyces cerevisiae; метод подходит только для прозрачных исследуемых образцов.

Назначение и область применения

HiMedia MV254-500G HiVeg — среда для антибиотического анализа №13, предназначенная для определения активности антибиотиков и противогрибковых препаратов турбидиметрическим методом.

Среда применяется для анализа противогрибковых препаратов, включая кандицидин — полиеновый антибиотик с противогрибковой активностью. В качестве тест-организма используется Saccharomyces cerevisiae. Анализ проводят подсчётом бластоспор или измерением мутности питательной среды.

Метод применяют только для прозрачных исследуемых образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована в соответствии с рабочими параметрами.

Принцип измерения

Пептоны растительного происхождения используются вместо животных пептонов, поэтому среда не связана с рисками BSE/TSE. По назначению среда соответствует среде для антибиотического анализа №13; обозначение численно идентично названию, присвоенному Grove и Randall.

Методы антибиотического анализа были описаны Grove и Randall. Schmidt и Moyer сообщали об использовании среды для антибиотического анализа в жидкой форме при выполнении таких анализов.

Среда также обозначается как модифицированный жидкий бульон Сабуро или жидкая среда Сабуро. Состав обеспечивает усиленный рост тест-организма Saccharomyces cerevisiae, используемого при анализе кандицидина.

Декстроза служит источником углерода. Пептон HiVeg® обеспечивает необходимые питательные вещества и факторы, стимулирующие рост. Значение pH среды поддерживается на оптимальном для роста Saccharomyces cerevisiae уровне.

Турбидиметрический антибиотический анализ основан на изменении или подавлении роста тест-микроорганизма в жидкой среде с однородной концентрацией антибиотика. После инкубации тест-организма в рабочих разведениях антибиотика количество выросшей биомассы определяют по светопропусканию с помощью спектрофотометра. Концентрацию антибиотика устанавливают сравнением количества роста, полученного для исследуемых растворов, с количеством роста, соответствующим растворам стандартного образца.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 30 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм — ориентировочно 0,103 МПа (≈1,03 бар) — и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите приготовленную среду.
5. Разлейте среду в необходимом объёме.

Методика антибиотического анализа

1. Подготовьте рабочие разведения антибиотика.
2. Внесите тест-организм Saccharomyces cerevisiae в жидкую среду, содержащую однородную концентрацию антибиотика.
3. Инкубируйте тест-организм в рабочих разведениях исследуемого антибиотика.
4. Определите количество роста по светопропусканию среды с помощью спектрофотометра либо подсчётом бластоспор.
5. Сравните полученные значения роста с результатами для растворов стандартного образца.
6. Рассчитайте концентрацию антибиотика по результатам сравнительного анализа.

Контроль качества

Внешний вид и свойства приготовленной среды

• Внешний вид сухой среды: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный раствор светло-янтарного цвета в пробирках.
• Реакция: реакция 3,0 % водного раствора по массе к объёму при 25 °C.
• pH 3,0 % водного раствора при 25 °C: 5,6 ± 0,2.
• Диапазон pH: 5,40–5,80.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Наименование среды: HiVeg среда для антибиотического анализа №13.
• Артикул: MV254-500G.
• Масса: 500 г.
• Температурный диапазон, указанный для продукта: 10–30 °C.

Хранение и срок годности

• Хранить в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C.
• Использовать свежеприготовленную среду.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Примечание по выбору среды

Методы антибиотического анализа и выбор сред HiVeg для антибиотического анализа приведены в разделе «Среды HiVeg для антибиотического анализа».