HiMedia MV167-500G HiVeg среда для антибиотического анализа №20

Сухая питательная среда HiMedia MV167-500G HiVeg для антибиотического анализа №20 в форме порошка, не содержащая компонентов животного происхождения. Среда предназначена для турбидиметрического определения амфотерицина B с использованием Candida tropicalis ATCC 13803 и применяется только для прозрачных исследуемых образцов.

Назначение и область применения

HiMedia MV167-500G используется для приготовления жидкой питательной среды для антибиотического анализа №20, аналогичной среде на основе дрожжевого и мясного бульона, но с заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны HiVeg®.

Среда применяется:

• для турбидиметрического анализа амфотерицина B с использованием Candida tropicalis ATCC 13803;
• для определения микостатической активности лекарственных препаратов;
• для антибиотического анализа в жидкой питательной среде.

Метод подходит только для прозрачных исследуемых образцов.

Состав

Состав на 1 л среды:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам среды.

Принцип действия и интерпретация

Антибиотическая среда HiVeg® №20 приготовлена с использованием растительных пептонов вместо пептонов животного происхождения. Такой состав не содержит компонентов животного происхождения и предназначен для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE).

Турбидиметрический антибиотический анализ основан на изменении или ингибировании роста тест-микроорганизма в жидкой среде, содержащей однородную концентрацию антибиотика. После инкубации тест-микроорганизма в рабочих разведениях антибиотика количество выросшей биомассы определяют по светопропусканию с помощью спектрофотометра. Концентрацию антибиотика устанавливают сравнением величины роста в исследуемых растворах с ростом, полученным для стандартных растворов антибиотика.

Высокое содержание питательных компонентов обеспечивает рост Candida tropicalis:

• пептон HiVeg®, дрожжевой экстракт, экстракт HiVeg® и гидролизат HiVeg® служат источниками питательных веществ;
• декстроза обеспечивает микроорганизм источником углерода и энергии;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, необходимое для сохранения целостности и жизнеспособности клеток;
• фосфаты обеспечивают буферное действие среды.

Методика приготовления среды

1. Отвесьте 42,5 г порошка среды.
2. Суспендируйте порошок в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию до полного растворения среды.
4. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C и давлении около 0,103 МПа (15 фунтов давления) в течение 15 мин.
5. Охладите приготовленную среду.
6. Разлейте среду в необходимом объёме.

Методика турбидиметрического анализа

Турбидиметрическое определение выполняют после инкубации тест-микроорганизма в рабочих разведениях антибиотика. Количество роста определяют по светопропусканию с помощью спектрофотометра, после чего концентрацию антибиотика рассчитывают сравнением результатов с показателями стандартных растворов антибиотика.

Для анализа амфотерицина B используют Candida tropicalis ATCC 13803. Метод применяют к прозрачным образцам; мутные образцы могут влиять на измерение светопропускания.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор янтарного цвета в пробирках.

Реакция среды и pH

Реакцию определяют для водного раствора концентрацией 4,25 % масс./объём при температуре 25 °C.

• Конечный pH при 25 °C: 6,6 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,40–6,80

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Хранить при температуре ниже 30 °C.
• Использовать плотно закрытую упаковку.
• Приготовленную среду использовать свежеприготовленной.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.