HiMedia MV1575A-100G Селективный HiCrome агар для E. coli O157:H7, HiVeg

Селективная хромогенная питательная среда HiMedia MV1575A-100G Селективный HiCrome агар для E. coli O157:H7, HiVeg — порошковая агаровая основа без компонентов животного происхождения для выборочного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов. Среда предназначена для селективного культивирования и визуального выявления целевого микроорганизма по окраске колоний, однако отдельные штаммы могут расти на среде слабо из-за различий в пищевых потребностях.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и облегчённого выявления Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 31,85 г порошка в 990 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки NP Selective Supplement (FD187).
6. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Модифицированная селективная агаровая основа HiCrome® EC O157:H7 Selective HiVeg®™ соответствует основе HiCrome® EC O157:H7 Selective Agar Base, Modified, за исключением полной замены пептонов животного происхождения на пептоны растительного происхождения. Такая замена исключает риски, связанные с использованием пептонов животного происхождения.

Энтерогеморрагические штаммы E.coli также обозначают как штаммы, продуцирующие вероцитотоксин (VTEC/EHEC). Известно множество серотипов Escherichia coli, способных продуцировать вероцитотоксин, однако серотипы Escherichia coli O157:H7 относятся к наиболее распространённым причинам инфекций человека. Штаммы O157 VTEC обладают рядом необычных биохимических признаков, используемых для лабораторной идентификации. Они относятся к меньшинству штаммов E.coli, отрицательных по β-глюкуронидазе, и не ферментируют сорбитол или рамнозу в течение 24 ч. Выделение таких штаммов из фекальных образцов возможно посевом на среды, содержащие D-сорбитол вместо лактозы.

Агар HiCrome® EC O157:H7 основан на рецептуре, описанной Rappaport и Henigh. Среда содержит сорбитол в качестве ферментируемого углевода и хромогенную смесь вместо лактозы и индикаторных красителей соответственно. Хромогенный субстрат специфично и избирательно расщепляется Escherichia coli O157:H7 с образованием окрашенного соединения от тёмно-фиолетового до пурпурно-малинового цвета. Колонии E.coli приобретают голубовато-зелёную окраску.

Гидролизат HiVeg®™ и дрожжевой экстракт обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и питательными веществами, необходимыми для роста. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие. Добавление селективной добавки NP Selective Supplement (FD187) придаёт среде селективные свойства. Теллурит калия избирательно подавляет виды Aeromonas и Providencia. Новобиоцин подавляет грамположительные бактерии. Синтетическое моющее средство № 1 и лаурилсульфат натрия способствуют подавлению сопутствующей грамположительной микрофлоры.

Образцы

Тип образца: пищевые образцы.

Сбор и обработка образцов

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методики отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Из-за различий в пищевых потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост на этой среде.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных температурных условиях.

Контроль качества

Внешний вид

Цвет: от кремового до жёлтого.

Состояние: однородный, сыпучий порошок.

Желирование

Гель: плотный, сопоставимый с гелем 1,5%-ного агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция

Условия определения: реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,18 % при 25 °C.

pH: 6,8 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определены после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с добавлением селективной добавки NP Selective Supplement (FD187).

• Соответствующие номера WDCM.

** Ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

Условия хранения и срок годности

• Хранение сухого продукта: при 15–25 °