HiMedia MV1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg

HiMedia·Арт.: 0051445·Арт. произв.: MV1540A-500G

HiMedia MV1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg

Name: HiMedia MV1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg
Brand: HiMedia
SKU: 0051445
Price: 27489 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ27 489 руб.

Селективная дифференциальная среда HiMedia MV1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg на растительной основе. Предназначена для выделения и дифференциации Listeria monocytogenes из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды.

Описание

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Оттавиани и Агости, рекомендованной ISO, APHA и FDA-BAM. В данной модификации (HiVeg) животные пептоны полностью заменены растительными для исклюпания рисков BSE/TSE.

Питание: Растительный пептон №1, гидролизат и дрожжевой экстракт обеспечивают азот, углерод, аминокислоты и витамины. Пируват натрия служит дополнительным питательным компонентом.
Селективность: Хлорид лития и селективные добавки (FD212A) подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
Дифференциация: Виды Listeria гидролизируют хромогенный субстрат (5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), что приводит к образованию колоний синего или зеленого цвета.
Идентификация L. monocytogenes: Дифференциация от других видов листерий основана на активности специфической фосфолипазы C (PIPLC). Фермент гидролизует очищенный субстрат (FD214), создавая вокруг колоний L. monocytogenes характерный опалесцирующий (матовый) ореол.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 11290, FDA BAM и методу Оттавиани-Агости.

Стандартный состав (согласно Ottaviani and Agosti), г/л:

Компонент	г/л
Энзимный гидролизат тканей животных	18,000
Энзимный гидролизат казеина	6,000
Дрожжевой экстракт	10,000
Пируват натрия	2,000
Глюкоза	2,000
Магния глицерофосфат	1,000
Сульфат магния (безводный)	0,500
Хлорид натрия	5,000
Хлорид лития	10,000
Гидрофосфат натрия (безводный)	2,500
5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид	0,050
Агар	12,00–18,00
Конечный pH (после стерилизации)	7,2 ± 0,2

Состав MV1540A (HiVeg®), г/л:

Компонент	г/л
Растительный пептон HiVeg® № 1	18,000
Гидролизат HiVeg®	6,000
Дрожжевой экстракт	10,000
Пируват натрия	2,000
Глюкоза (декстроза)	2,000
Магния глицерофосфат	1,000
Сульфат магния	0,500
Хлорид натрия	5,000
Хлорид лития	10,000
Гидрофосфат натрия	2,500
5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид	0,050
Агар	15,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2

Добавки (вносятся после автоклавирования)

Добавка I (Селективная добавка OA)

Состав на 1 л среды:

Компонент	г/л
Налидиксовая кислота (натриевая соль)	0,020
Цефтазидим	0,020
Полимиксин B сульфат	76 700 МЕ
Циклогексимид ИЛИ Амфотерицин B	0,050 / 0,010

Состав одной виалы селективной добавки OA (FD212A, в упаковке 2 виалы):

Компонент	мг/виала
Налидиксовая кислота (натриевая соль)	10,000
Цефтазидим	10,000
Полимиксин B сульфат	38 350 МЕ
Амфотерицин B	5,000

Добавка II (Обогатительная добавка LP 1)

Состав на 1 л среды:

Компонент	Концентрация
L-α-фосфатидилинозитол	2,00

Состав одной виалы обогатительной добавки LP 1 (FD214, в упаковке 2 виалы):

Компонент	Масса
LP Enrichment Supplement 1	1,000 г

Методика приготовления и анализа

Суспендируйте 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
Охладите среду до 45–50 °C.
Асептически добавьте стерильное содержимое одной виалы обогатительной добавки LP 1 (FD214) и стерильное регидратированное содержимое селективной добавки OA (FD212A).
Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Технические характеристики

Назначение: Селективный и дифференциальный изоляционный агар
Вес упаковки: 500 г
Внешний вид: Гомогенный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета
Свойства геля: Плотный, сопоставим с 1,5 % агаровым гелем
Цвет и прозрачность готовой среды: Светло-янтарный, опалесцирующий гель
Диапазон pH (при 25 °C): 7,00–7,40
Тип продукта: HiVeg™ (без компонентов животного происхождения)
Форма выпуска: Порошок
Материал упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 часов. Оценка восстановления проводится относительно контрольной среды соево-казеинового дигеста-агара (TSA).

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Восстановление	Цвет колонии	Активность PIPLC
Listeria monocytogenes ATCC 13932	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	Сине-зеленый	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Listeria monocytogenes ATCC 35152	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	Сине-зеленый	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Listeria innocua ATCC 33090	$10^3$ – $10^4$	обильный	—	Сине-зеленый	отрицательная
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—

Ограничения применения

Некоторые штаммы L. monocytogenes, подвергшиеся стрессу (особенно кислотному), могут демонстрировать очень слабый ореол или его отсутствие.
Для дифференциации между L. monocytogenes и L. ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, так как оба вида проявляют активность PIPLC (матовый ореол).
Некоторые организмы, не относящиеся к Listeria spp., могут образовывать синие колонии; для их идентификации необходима биохимическая характеристика.

Условия эксплуатации и хранения

Температура хранения порошка: 15–25 °C в плотно закрытом контейнере.
Температура хранения готовой среды: 2–8 °C.
Особенности: Продукт гигроскопичен. После вскрытия флакон следует плотно закрывать для предотвращения комкования. Хранить в сухом проветриваемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
Утилизация: Использованные среды и загрязненные материалы подлежат обязательному автоклавированию или инсинерации.