HiMedia MV1540A-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор)

HiMedia·Арт.: 0051444·Арт. произв.: MV1540A-1KT

HiMedia MV1540A-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор)

Name: HiMedia MV1540A-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор)
Brand: HiMedia
SKU: 0051444
Price: 26021 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ26 021 руб.

Хромогенный агар HiMedia MV1540A-1KT HiCrome для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор) на основе растительных пептонов. Предназначен для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды.

Описание

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Оттавиани и Агости, принятой комитетом ISO, а также рекомендована APHA и FDA-BAM. В данной модификации (HiVeg) животные пептоны полностью заменены растительными для исключения рисков BSE/TSE.

Принцип дифференциации основан на двух механизмах:

Хромогенная реакция: виды Listeria гидролизируют хромогенный субстрат (5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), что приводит к образованию колоний синего или зеленого цвета.
Активность фосфолипазы C: дифференциация L. monocytogenes от других видов листерий основана на активности специфической фосфолипазы C (PIPLC), которая гидролизует очищенный субстрат (добавляемый с добавкой FD214), создавая непрозрачный ореол вокруг колоний L. monocytogenes.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 11290, FDA BAM и методу Оттавиани-Агости.

Сравнение состава (стандарт vs HiVeg)

Компонент	Стандарт (г/л)	HiVeg MV1540A (г/л)
Ферментный гидролизат тканей животных / HiVeg® пептон №1	18,000	18,000
Ферментный гидролизат казеина / HiVeg® гидролизат	6,000	6,000
Экстракт дрожжей	10,000	10,000
Пируват натрия	2,000	2,000
Глюкоза (декстроза)	2,000	2,000
Глицерофосфат магния	1,000	1,000
Сульфат магния (безводный)	0,500	0,500
Хлорид натрия	5,000	5,000
Хлорид лития	10,000	10,000
Гидрофосфат натрия (безводный)	2,500	2,500
5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкопиранозид	0,050	0,050
Агар	12,00–18,00	15,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2	7,2 ± 0,2

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

Суспендируйте 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,07 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладите среду до 45–50 °C.
В асептических условиях добавьте содержимое 1 флакона добавки для обогащения LP Enrichment Supplement 1 (FD214) и стерилизованное регидратированное содержимое селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A).
Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.

Добавки (вводятся после автоклавирования)

Селективная добавка OA (FD212A):

Состав на 1 л: налидиксовая кислота (соль натрия) 0,020 г, цефтазидим 0,020 г, полимиксин B сульфат 76 700 МЕ, циклогексимид (или амфотерицин B 0,010 г) 0,050 г.
Состав одного флакона: налидиксовая кислота 10 мг, цефтазидим 10 мг, полимиксин B сульфат 38 350 МЕ, амфотерицин B 5 мг.

Добавка для обогащения LP (FD214):

L-α-фосфатидилинозитол: 2,00 г/л (1,000 г на флакон).

Культуральные характеристики

Инкубация при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 часов.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход	Цвет колонии	Активность PIPLC
Listeria monocytogenes ATCC 13932	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	сине-зеленый	положительная, непрозрачный ореол
Listeria monocytogenes ATCC 35152	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	сине-зеленый	положительная, непрозрачный ореол
Listeria innocua ATCC 33090	$10^3$ – $10^4$	обильный	—	сине-зеленый	отрицательная
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—

Ограничения применения

Некоторые штаммы L. monocytogenes, подвергшиеся стрессу (особенно кислотному), могут демонстрировать очень слабый ореол или его отсутствие.
Для дифференциации между L. monocytogenes и L. ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, так как оба вида проявляют активность PIPLC (непрозрачный ореол).
Некоторые организмы, не относящиеся к Listeria spp., могут образовывать синие колонии; требуется биохимическая характеристика для подтверждения.

Технические характеристики

Параметр	Значение
Происхождение	Без компонентов животного происхождения (растительная основа)
Тип продукта	HiVeg™
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Внешний вид	Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до желтого цвета
Желирование	Плотный гель (сопоставимо с 1,5 % агаром)
Цвет и прозрачность среды	Светло-янтарный опалесцирующий гель
Диапазон pH	7,00–7,40

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание комкования.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Требования: хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников воспламенения и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с правилами работы с инфекционными материалами.