HiMedia MV1540A-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор)

Сухая селективная и дифференциальная питательная среда HiMedia MV1540A-1KT HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg (1 набор) производства HiMedia с растительными пептонами для выделения Listeria monocytogenes. Среда предназначена для анализа пищевых продуктов, кормов и образцов окружающей среды в пищевой промышленности; характерные колонии Listeria monocytogenes имеют сине-зелёную окраску и непрозрачный ореол вследствие активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из:

• пищевых продуктов;
• кормов для животных;
• образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

В составе HiVeg-питательной среды животные пептоны полностью заменены растительными пептонами. Процедура предназначена для выявления Listeria spp. с последующей дифференциацией Listeria monocytogenes по активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC).

Состав

Рецептура по спецификации ISO 11290 и FDA BAM

Агар Listeria по Оттавиани и Агости. Расчётное содержание компонентов — г/л.

MV1540A — агаровая основа HiCrome Listeria Ottaviani-Agosti HiVeg

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Пептон HiVeg № 1 эквивалентен ферментативному перевару тканей животных. Гидролизат HiVeg эквивалентен ферментативному перевару казеина.

Добавки после автоклавирования

Селективная добавка I

Состав на 1 л среды:

Флакон FD212A-2, селективная добавка OA

Добавка II

Два флакона FD214, обогатительная добавка LP 1

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда основана на рецептуре Оттавиани и Агости для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов. Методика принята техническим комитетом ISO и также используется в методах APHA и FDA-BAM как метод выделения Listeria monocytogenes.

Listeria monocytogenes и Listeria innocua обладают сходными биохимическими свойствами, поэтому их нельзя надёжно дифференцировать на традиционных средах PALCAM и Oxford.

Компоненты среды выполняют следующие функции:

• пептон HiVeg № 1, гидролизат HiVeg и дрожжевой экстракт поставляют азотистые и углеродистые соединения, аминокислоты с длинной цепью, витамины и другие необходимые питательные вещества;
• пируват натрия обеспечивает организм дополнительными питательными веществами, необходимыми для роста;
• глюкоза (декстроза) является сбраживаемым углеводом;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие;
• фосфат выполняет буферную функцию;
• хлорид лития и селективные добавки FD212A подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост видов Listeria;
• виды Listeria гидролизуют хромогенный субстрат 5-бром-4-хлор-3-индолил-β-D-глюкопиранозид, в результате чего образуются сине-зелёные колонии;
• дифференциация Listeria monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC);
• фосфолипаза C гидролизует очищенный субстрат фосфатидилинозитол (FD214), добавленный в среду, с образованием непрозрачного ореола вокруг колоний Listeria monocytogenes.

Патогенность Listeria ivanovii для человека считается неопределённой. Для дифференциации Listeria monocytogenes и Listeria ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, поскольку оба вида могут образовывать непрозрачный ореол, связанный с активностью PIPLC.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Простерилизуйте среду автоклавированием при давлении 15 фунтов-силы на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное содержимое одного флакона обогатительной добавки LP 1 (FD214).
6. Добавьте стерильное регидратированное содержимое селективной добавки OA (FD212A).
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Тип образца

• Пищевые продукты.
• Корма для животных.
• Образцы окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Отбор и обращение с образцами

При работе с пищевыми продуктами, кормами и образцами окружающей среды применяйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. Некоторые штаммы Listeria monocytogenes, подвергшиеся стрессовым воздействиям, особенно кислотному стрессу, могут образовывать очень слабый ореол или не образовывать его.
2. Для дифференциации Listeria monocytogenes и Listeria ivanovii необходимо провести дополнительные биохимические тесты, поскольку оба вида проявляют активность PIPLC с образованием непрозрачного ореола.
3. Некоторые микроорганизмы, не относящиеся к Listeria spp., также могут образовывать на этой среде синие колонии. Для их дифференциации требуется биохимическая характеристика.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, легко сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией.

Реакция

Реакция 7,2 % водного раствора при 25 °C.

pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Продуктивность

К