HiMedia MV1540A-100G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg

HiMedia·Арт.: 0051443·Арт. произв.: MV1540A-100G

HiMedia MV1540A-100G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg

Name: HiMedia MV1540A-100G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg
Brand: HiMedia
SKU: 0051443
Price: 8080 RUB
Availability: PreOrder

Под заказ8 080 руб.

Хромогенная селективная среда HiMedia MV1540A-100G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости, HiVeg для изоляции и дифференциации Listeria monocytogenes. Рекомендуется для анализа пищевых продуктов, кормов для животных и проб окружающей среды на объектах пищевой промышленности; основа среды полностью состоит из растительных пептонов (HiVeg) для исключения рисков BSE/TSE.

Описание

Принцип измерения

Среда основана на рецептуре Оттавиани и Агости, принятой комитетом ISO, а также рекомендована APHA и FDA-BAM.

Питательные компоненты: растительный пептон № 1 (HiVeg), гидролизат (HiVeg) и экстракт дрожжей обеспечивают азот, углерод, длинноцепочечные аминокислоты и витамины. Пируват натрия служит дополнительным источником питания для роста.
Селективность: хлорид лития и селективные добавки (FD212A) подавляют рост сопутствующей микрофлоры.
Дифференциация: виды Listeria гидролизируют хромогенный субстрат (5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид), что приводит к образованию колоний сине-зелёного цвета.
Идентификация L. monocytogenes: основана на активности фосфатидилинозитол-специфической фосфолипазы C (PIPLC). Фермент гидролизует очищенный субстрат (FD214), в результате чего вокруг колоний L. monocytogenes образуется матовый (опалесцирующий) ореол.

Состав

Состав соответствует спецификациям ISO 11290, FDA BAM и методике Оттавиани и Агости.

Базовая среда MV1540A (HiVeg)

Компонент	г/л
Растительный пептон HiVeg® № 1 (эквивалент ферментного гидролизата тканей животных)	18,000
Гидролизат HiVeg® (эквивалент ферментного гидролизата казеина)	6,000
Экстракт дрожжей	10,000
Пируват натрия	2,000
Глюкоза (декстроза)	2,000
Магния глицерофосфат	1,000
Сульфат магния	0,500
Хлорид натрия	5,000
Хлорид лития	10,000
Гидрофосфат натрия двунатриевый	2,500
5-бром-4-хлоро-3-индолил-β-D-глюкопиранозид	0,050
Агар	15,000
Конечный pH (при 25 °C)	7,2 ± 0,2

Селективные и обогащающие добавки (вносятся после автоклавирования)

Добавка I (Селективная добавка OA)

Компонент	г/л
Натриевая соль налидиксовой кислоты	0,020
Цефтазидим	0,020
Полимиксин B сульфат	76 700 МЕ
Циклогексимид ИЛИ Амфотерицин B	0,050 / 0,010

Состав одной ампулы селективной добавки OA (FD212A):

Натриевая соль налидиксовой кислоты: 10,000 мг
Цефтазидим: 10,000 мг
Полимиксин B сульфат: 38 350 МЕ
Амфотерицин B: 5,000 мг

Добавка II (Обогащающая добавка LP Enrichment Supplement 1)

Компонент	Концентрация
L-α-фосфатидилинозитол	2,00

Состав одной ампулы LP Enrichment Supplement 1 (FD214): 1,000 г.

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

Суспендировать 36,02 г порошка в 465 мл очищенной или дистиллированной воды.
Нагревать до кипения для полного растворения компонентов.
Стерилизовать в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
Охладить до 45–50 °C.
В асептических условиях добавить стерильное содержимое одной ампулы LP Enrichment Supplement 1 (FD214) и стерилизованный регидратированный состав селективной добавки OA (FD212A).
Тщательно перемешать и разлить в стерильные чашки Петри.

Ограничения метода

Некоторые штаммы L. monocytogenes, подвергшиеся стрессу (особенно кислотному), могут иметь очень слабый ореол или не образовывать его вовсе.
Для дифференциации между L. monocytogenes и L. ivanovii требуются дополнительные биохимические тесты, так как оба вида проявляют активность PIPLC (матовый ореол).
Некоторые организмы, не относящиеся к роду Listeria, могут образовывать синие колонии; в таких случаях необходима биохимическая характеристика.

Технические характеристики

Параметр	Значение
Происхождение компонентов	Без использования животных белков (растительный состав)
Тип продукта	HiVeg™
Физическая форма	Порошок
Тип упаковки	ПНД (HDPE)
Вес	100 г
Внешний вид	Гомогенный свободнотекущий порошок от кремового до жёлтого цвета
Желирование	Плотное, сопоставимо с 1,5 % агаровым гелем
Цвет и прозрачность готовой среды	Светло-янтарный, опалесцирующий гель
pH (водный раствор 7,2 % при 25 °C)	7,00–7,40

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании селективной добавки OA (FD212A) и обогащающей добавки LP Enrichment Supplement 1 (FD214) после инкубации при 37 ± 1 °C в течение 48 ± 4 часов.

Организм	Посевная доза (КОЕ)	Рост	Выход (Recovery)	Цвет колонии	Активность PIPLC
Listeria monocytogenes ATCC 13932	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	Сине-зелёный	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Listeria monocytogenes ATCC 35152	50–100	обильный	$\ge$ 50 %	Сине-зелёный	положительная, матовый ореол вокруг колонии
Listeria innocua ATCC 33090	$10^3$ – $10^4$	обильный	—	Сине-зелёный	отрицательная
Escherichia coli ATCC 25922	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Escherichia coli ATCC 8739	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 19433	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—
Enterococcus faecalis ATCC 29212	$\ge 10^4$	подавлен	—	—	—

Условия эксплуатации и хранения

Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C. Из-за гигроскопичности продукта необходимо плотно закрывать крышку во избежание комкования.
Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
Требования к безопасности: использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица. После использования контаминированные материалы должны быть стерилизованы в автоклаве перед утилизацией.