L.mono дифференциальный HiVeg® агар-основа HiMedia MV1540-500G (500 г)

Сухая дифференциальная среда L.mono дифференциальный HiVeg® агар-основа HiMedia MV1540-500G (500 г), производства HiMedia, предназначена для селективного выделения и дифференциации Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов. Дифференциация основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC): вокруг колоний L. monocytogenes формируется непрозрачный ореол.

Назначение и принцип действия

Среда предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов. В основе рецептуры — состав Ottaviani и Agosti; по сравнению с исходной средой L. mono Differential Agar Base животные пептоны заменены растительными пептонами HiVeg®, не связанными с риском губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивных губчатых энцефалопатий.

Listeria monocytogenes — грамположительный пищевой патоген человека, способный вызывать тяжёлые инфекции у беременных, включая аборт, мертворождение и неонатальный листериоз с менингитом, а также первичную бактериемию у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека не установлена. L. monocytogenes и L. innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не различаются на традиционных средах PALCAM и Oxford.

Пептон HiVeg® № 1, гидролизат HiVeg®, дрожжевой экстракт и пируват натрия обеспечивают поступление питательных веществ и азотистых соединений. Глюкоза служит ферментируемым углеводом, хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие, а фосфат выполняет буферную функцию. Хлорид лития и селективные добавки FD212 и FD213 подавляют сопутствующую микрофлору и обеспечивают рост бактерий рода Listeria. Бактерии Listeria гидролизуют хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии зелёного цвета. Дифференциация L. monocytogenes от других видов Listeria основана на активности PIPLC: фермент гидролизует очищенный субстрат из добавки FD214, вследствие чего вокруг колоний L. monocytogenes образуется непрозрачный ореол.

Состав

Содержание компонентов на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизована для обеспечения заданных характеристик среды.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 36,02 г сухой среды в 460 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное давление — 15 psi (≈0,10 МПа).
4. Охладите до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное содержимое одного флакона добавки для обогащения L. mono Enrichment Supplement I (FD214) и стерильное регидратированное содержимое добавок L. mono Selective Supplement I (FD212) и L. mono Selective Supplement II (FD213).
6. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Контроль качества и характеристики готовой среды

Внешний вид сухой среды: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем на основе 1,5 % агара.

Цвет и прозрачность готовой среды: в чашках Петри образуется гель светло-янтарного цвета с опалесценцией.

Реакция: pH 7,2 ± 0,2 для водного раствора с массово-объёмной концентрацией 7,2 % при 25 °C.

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Характеристики определяют после добавления стерильных добавок L. mono Selective Supplement I (FD212), L. mono Selective Supplement II (FD213) и L. mono Enrichment Supplement I (FD214), после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.