HiMedia MV077-500G Entamoeba HiVeg среда

Сухая питательная среда HiMedia MV077-500G Entamoeba HiVeg для культивирования Entamoeba histolytica. Предназначена для выделения и выращивания патогенных амеб из клинических образцов; состав полностью свободен от компонентов животного происхождения (Animal Free).

Принцип работы

Среда разработана на основе рецептур Кливленда, Сандерса и Кольера для культивирования Entamoeba histolytica — единственной формы амеб, патогенной для человека. В составе используются растительные пептоны (HiVeg® infusion No. 1 и HiVeg® peptone No. 3), которые обеспечивают необходимые аминокислоты и азотистые вещества, исключая риски заражения BSE/TSE (губчатой энцефалопатией). Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс, а натрия альфа-глицерофосфат служит источником фосфора. Среда обладает высокой специфичностью: E. histolytica растёт на ней обильно, в то время как другие кишечные амебы растут плохо.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

Приготовление среды

1. Суспендируйте 33,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Разлейте по пробиркам и стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Оставьте пробирки до полного застывания в скошенном положении (формирование скоса).
6. Важно: избегайте перегрева (пригорания) среды.

Процедура посева

1. Покройте примерно половину поверхности скоса свежей стерильной смесью сыворотки лошади и физиологического раствора (в пропорции 1:6).
2. Добавьте петлёй (объёмом 5 мм) рисовый порошок, предварительно стерилизованный в сухом жару при 160 °C в течение одного часа.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекущий порошок от светло-жёлтого до коричневато-жёлтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,1% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: тёмно-янтарный, слегка опалесцирующий гель (в пробирках со скосом).
• Реакция: pH 6,80–7,20 (водный раствор 3,3% м/в при 25 °C: 7,0 ± 0,2).

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 25–30 °C в течение 68–72 часов.

Область применения и ограничения

Применяется для анализа клинических образцов. Ограничения: другие виды кишечных амеб не растут на данной среде readily (затруднённый рост).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C в сухом вентилируемом месте, защищённом от источников воспламенения и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе с образцами и культурами следует соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности, использовать защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз/лица.
• Утилизация: все загрязнённые материалы должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами работы с инфекционными материалами.