HiMedia MV025-500G Жидкая селенит-цистиновая HiVeg среда

Питательная среда HiMedia MV025-500G Жидкая селенит-цистиновая HiVeg — порошковая двухкомпонентная среда для селективного обогащения культур. Применяется для выделения Salmonella из пищевых продуктов, молочных продуктов и санитарных образцов при хранении продукта при 10–30 °C.

Назначение

HiMedia MV025-500G предназначена для обогащения и выделения Salmonella из пищевых продуктов, молочных продуктов и материалов санитарных образцов.

Среда используется для обнаружения Salmonella при низкой численности микроорганизмов в фекалиях в непатогенной или неострой стадии заболевания, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения выявляемости микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MV025-500G
• Назначение изделия: питательная среда
• Тип продукта: HiVeg™
• Физическая форма: порошок
• Комплектность формулы: часть A и часть B
• Происхождение компонентов: без компонентов животного происхождения, растительного происхождения
• Углевод: лактоза
• Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
• Масса: 500 г
• Температура хранения продукта: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C
• Конечный pH при 25 °C: 7,0 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,80–7,20
• Температура инкубации при контроле культуральных характеристик: 35–37 °C
• Продолжительность инкубации при контроле культуральных характеристик: 18–24 ч

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита впервые продемонстрировано Клеттом. Гут использовал селенит для выделения Salmonella Typhi. Лейфсон изучал селенит и разработал среду на его основе. Жидкая селенит-цистиновая среда представляет собой модификацию формулы Лейфсона с добавлением цистина.

Формуляция соответствует рекомендациям AOAC по обнаружению Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах. Среда также рекомендована APHA и USP как часть соответствующих методик.

Селенит-цистиновый бульон применяют для обнаружения Salmonella при низкой численности микроорганизмов в фекалиях в непатогенной или неострой стадии заболевания, а также для эпидемиологических исследований, направленных на повышение выявляемости небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Salmonella может быть повреждена в процессе различных процедур обработки пищевых продуктов, включая воздействие низких температур, недостаточного нагрева, высушивания, радиации, консервантов или дезинфицирующих средств. Выделение повреждённых клеток Salmonella из пищевых образцов включает предварительное обогащение, селективное обогащение и селективный посев, поскольку Salmonella может присутствовать в образце в небольшом количестве и в повреждённом состоянии.

Жидкая селенит-цистиновая среда HiVeg® аналогична жидкой селенит-цистиновой среде, но животные пептоны полностью заменены растительными пептонами для исключения рисков, связанных с BSE/TSE. Среда HiVeg® используется как селективная обогатительная среда для культивирования видов Salmonella. Формуляция обеспечивает размножение Salmonella при одновременном подавлении роста конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella.

Функции компонентов:

• Гидролизат HiVeg® обеспечивает азотистые питательные вещества.
• Лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает pH среды при восстановлении селенита бактериальными клетками и образовании щёлочи.
• Повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к чрезмерному росту других бактерий.
• Кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, поддерживает нейтральный pH.
• Фосфат стабилизирует pH и одновременно снижает токсичность селенита.
• L-цистин действует как восстановитель и улучшает восстановление Salmonella.

Обогащённый бульон пересевают на плотную питательную среду. Бульон нельзя инкубировать более 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 4,0 г части B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г части A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагрейте смесь до полного растворения среды.
5. Разлейте приготовленную среду в стерильные пробирки.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке пара в течение 10 мин.
7. Не стерилизуйте в автоклаве.
8. Не допускайте чрезмерного нагревания, поскольку он ухудшает свойства среды.
9. Приготовленную среду утилизируйте, если произошло значительное восстановление селенита, на что указывает появление красного осадка на дне пробирки или флакона.

Вместо части B допускается использовать стерильные диски биселенита натрия DD056 или стерильный стержень биселенита натрия DB001. Диск или стержень добавляют в растворённую среду части A после кипячения в указанных выше условиях в соответствующем количестве:

• DD056: один диск на 10 мл среды части A;
• DB001: один стержень на 100 мл среды части A.

Методика обогащения и пересев

1. Внесите пищевой образец в рекомендованный бульон предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой селенит-цистиновой среды HiVeg®.
3. Параллельно перенесите 1 мл смеси в 10 мл жидкой тетратионатной среды HiVeg® без йода и BG — MV032.
4. После инкубации выполните пересев на одну или несколько плотных сред:
   • бисульфит-висмутовый агар HiVeg® — MV027;
   • ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар HiVeg® — MV031;
   • агар Хектоена-Энтерик HiVeg® — MV467;
   • агар МакКонки HiVeg® — MV081.

Тип образцов

• Пищевые образцы.
• Молочные образцы.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте маркировку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте надлежащие правила работы в микробиологической лаборатории при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Указания по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Некоторые микроорганизмы могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор полной среды.

Реакция среды

Реакция среды при концентрации 1,9 % масс./об. части A и 0,4 % масс./об. части B, измеренная при 25 °C: pH 7,0 ± 0,2.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после