HiMedia MV025-100G Жидкая селенит-цистиновая HiVeg среда

Питательная среда HiMedia MV025-100G Жидкая селенит-цистиновая HiVeg среда для обогащения культур с рабочей температурой хранения 10–30 °C. Жидкая селенит-цистиновая среда применяется для выделения Salmonella из пищевых и молочных продуктов, санитарных образцов; подготовленную среду нельзя автоклавировать.

Назначение

Среда рекомендована для обогащения при выделении Salmonellae из пищевых продуктов, молочных продуктов и материалов санитарных образцов.

Тип образца: пищевые и молочные образцы.

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик работы среды.

Среда имеет растительное происхождение и не содержит компонентов животного происхождения; углеводный компонент — лактоза.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 4,0 г компонента B в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 19,01 г компонента A.
3. Тщательно перемешайте.
4. Нагрейте до полного растворения среды.
5. Разлейте среду в стерильные пробирки.
6. Стерилизуйте на кипящей водяной бане или в потоке свободно проходящего пара в течение 10 мин.
7. Не автоклавируйте среду. Чрезмерный нагрев ухудшает её характеристики.
8. Утилизируйте приготовленную среду, если произошло значительное восстановление селенита, о котором свидетельствует образование красного осадка на дне пробирки или флакона.

Альтернативные формы компонента B

Вместо компонента B можно использовать стерильные диски биселенита натрия DD056 или стерильный стержень биселенита натрия DB001. Диск или стержень добавляют к растворённому компоненту A после кипячения в указанных выше условиях в соответствующем количестве:

• DD056: один диск на 10 мл среды, приготовленной из компонента A;
• DB001: один стержень на 100 мл среды, приготовленной из компонента A.

Принцип действия и интерпретация

Селективное ингибирующее действие селенита было впервые продемонстрировано Klett. Guth применил селенит для выделения Salmonella Typhi. Leifson исследовал селенит и разработал среду на его основе. Жидкая селенит-цистиновая среда представляет собой модификацию формулы Leifson с добавлением цистина.

Рецептура соответствует рекомендациям AOAC по обнаружению Salmonella в пищевых продуктах, особенно в яичных продуктах, а также рекомендациям APHA и требованиям Фармакопеи США (USP) как методическим источникам для соответствующих областей применения.

Селенит-цистиновый бульон используют для обнаружения Salmonella при неострых стадиях заболеваний, когда количество микроорганизмов в фекалиях невелико, а также в эпидемиологических исследованиях для повышения выявляемости небольшого количества микроорганизмов у бессимптомных пациентов и пациентов в период выздоровления.

Клетки Salmonella могут повреждаться при различных процедурах обработки пищевых продуктов, включая воздействие низких температур, недостаточного нагрева, высушивания, радиации, консервантов или санитарно-моющих средств. Для восстановления и выявления Salmonella, присутствующей в пищевом образце в небольшом количестве и в повреждённом состоянии, применяют предварительное обогащение, селективное обогащение и селективный посев.

Жидкая селенит-цистиновая HiVeg® среда отличается от жидкой селенит-цистиновой среды полной заменой пептонов животного происхождения на растительные пептоны, что исключает риски, связанные с пептонами животного происхождения, включая BSE/TSE. Среда используется как селективная среда обогащения для культивирования видов Salmonella и позволяет пролиферации Salmonella при одновременном подавлении роста конкурирующих микроорганизмов, не относящихся к Salmonella.

Функции компонентов:

• гидролизат HiVeg® обеспечивает азотистые питательные вещества;
• лактоза является сбраживаемым углеводом и поддерживает pH среды при восстановлении селенита в процессе роста бактерий и образовании щёлочи;
• повышение pH снижает токсичность селенита и может привести к чрезмерному росту других бактерий;
• кислота, образующаяся при сбраживании лактозы, поддерживает нейтральный pH;
• фосфат стабилизирует pH и также снижает токсичность селенита;
• L-цистин является восстановителем и улучшает восстановление Salmonella.

После обогащения бульон пересевают на плотную питательную среду. Не инкубируйте бульон дольше 24 ч, поскольку ингибирующее действие селенита снижается через 6–12 ч инкубации.

Методика обогащения и пересев

1. Внесите пищевой образец в рекомендованный бульон для предварительного обогащения.
2. Перенесите 1 мл полученной смеси в 10 мл жидкой селенит-цистиновой HiVeg® среды.
3. Одновременно перенесите 1 мл смеси в 10 мл жидкой тетратионатной HiVeg® среды без йода и бриллиантового зелёного MV032.
4. Инкубируйте среды.
5. Выполните последующий пересев на одну или несколько плотных сред:
   • бисульфит-висмутный агар HiVeg® MV027;
   • агар XLD HiVeg® MV031;
   • энтерический агар Хектоена HiVeg® MV467;
   • агар МакКонки HiVeg® MV081.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч с последующим пересевом на агар XLD HiVeg® MV031.

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

• Компонент A: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Компонент B: однородный, сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет: светло-жёлтый.

Прозрачность: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор полной среды.

Реакция среды

Реакция среды для 1,9 %