HiMedia MU032-500G Жидкая тетратионатная среда

Обогащающая микробиологическая питательная среда HiMedia MU032-500G Жидкая тетратионатная среда представляет собой порошковый препарат для приготовления селективного бульона. Применяется для выделения Salmonella из фармацевтических образцов и других проб, предположительно загрязнённых сальмонеллами, с последующим пересевом обогащённой культуры на селективные агаризованные среды.

Назначение

Жидкая тетратионатная среда используется как обогащающий бульон для выделения Salmonella из образцов, предположительно загрязнённых сальмонеллами, включая фармацевтические образцы.

Среда рекомендована Фармакопеей США (USP) для микробиологических испытаний фармацевтических препаратов на соответствие требованиям по микробиологическим пределам.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Жидкая тетратионатная среда первоначально описана Мюллером и предназначена для селективного подавления колиформных микроорганизмов при сохранении неограниченного роста кишечных патогенов.

Состав среды соответствует формулировкам, применяемым для обогащения Salmonella в Фармакопее США (USP), редакция 2019 года, а также в методических документах по микробиологическому исследованию пищевых продуктов, воды и сточных вод.

Salmonella является распространённым возбудителем заболеваний от лёгкого гастроэнтерита до брюшного тифа и часто загрязняет пищевые продукты и другие биологические продукты. Среда поддерживает восстановление клеток Salmonella, повреждённых при обработке пищевых продуктов и утративших способность формировать колонии на плотной среде, но способных вызывать инфекцию при попадании в организм.

Желчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов. Селективность среды обусловлена совместным действием тиосульфата и тетратионата, образующегося после добавления йода и йодида калия, которые подавляют комменсальные колиформные микроорганизмы.

В бульоне активно развиваются микроорганизмы, содержащие тетратионатредуктазу. Тиосульфат натрия служит субстратом для тиосульфатредуктазы. Тиосульфат натрия также инактивирует галогены и может снижать их токсичность в исследуемой пробе, в том числе при испытаниях на микробиологические пределы.

Триптон и пептон обеспечивают среду необходимыми питательными веществами и витаминами. Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Хлорид натрия поддерживает осмотический баланс.

Методика приготовления среды

1. Суспендируйте 46,0 г порошка в 970 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите приготовленную основу до 45–50 °C.
5. В день использования добавьте 20 мл раствора йода. Раствор йода готовят из 5 г йодида калия и 6 г йода, растворённых в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду порциями по 10 мл.
9. После добавления раствора йода не нагревайте среду.
10. Используйте среду сразу после добавления йода.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Пробный материал и обращение с образцами

Тип образца: фармацевтический образец.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения метода

Для дополнительного подтверждения обогащённые культуры после инкубации следует высевать штриховым методом на следующие среды:

• агар с бриллиантовым зелёным (M016);
• агар МакКонки (M081);
• бисмут-сульфитный агар (M027).

Условия культивирования и культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч в жидкой тетратионатной среде с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода, после чего выполняют пересев на агар МакКонки (MU081).

* Соответствующие номера WDCM.

Контроль качества

Внешний вид

Белый или кремовый однородный легко сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода представляет собой светло-зелёный опалесцирующий раствор с белым осадком. При отстаивании осадок оседает.

Испытание на стимуляцию роста

Проводится согласно требованиям Фармакопеи США (USP).

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Хранить при температуре 10–30 °C в плотно закрытой ёмкости.
• Использовать свежеприготовленную среду.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия хранить продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывать ёмкость.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при работе с образцами и культурами.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов путём автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методиками.