Levine Eosin - метиленовый синий агаровая среда HiMedia MU022-500G (500 г)

Микробиологическая питательная среда Levine Eosin - метиленовый синий агаровая среда HiMedia MU022-500G (500 г) — сухая порошковая среда с pH после стерилизации 7,1 ± 0,2. Среда применяется для обнаружения, количественного определения и дифференциации колиформных бактерий, включая Escherichia coli, и подавляет рост некоторых грамположительных бактерий.

Состав

Состав на 1 л:

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных показателей эффективности.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,46 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное давление — 15 фунтов на квадратный дюйм (ориентировочно 0,10 МПа).
4. Не перегревайте среду.
5. Охладите до 50 °C и встряхните, чтобы окислить метиленовый синий и восстановить его синюю окраску, а также суспендировать осадок, являющийся необходимой частью среды.
6. Перед разливом в стерильные чашки Петри тщательно перемешайте.

Принцип действия и область применения

Среда Levine с эозином и метиленовым синим разработана Левином для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрой идентификации Candida albicans. Среду рекомендуют для обнаружения, количественного определения и дифференциации представителей группы колиформных бактерий.

Эозин Y и метиленовый синий придают среде слабоселективные свойства и подавляют рост некоторых грамположительных бактерий. Оба красителя выполняют функции индикаторов и ингибиторов, позволяя различать бактерии, ферментирующие лактозу, и неферментирующие бактерии. При кислых значениях pH эозин Y и метиленовый синий образуют комплекс, обладающий ингибирующим действием.

Панкреатический гидролизат желатина обеспечивает поступление необходимых питательных веществ и факторов роста. Фосфаты выполняют функцию буферной системы. Escherichia coli образует колонии с металлическим зелёным блеском, что указывает на интенсивную ферментацию лактозы.

Для быстрой идентификации Candida albicans в клинических образцах предложено использовать агар Levine EMB с добавлением гидрохлорида хлортетрациклина. На среде могут расти некоторые грамположительные бактерии, включая фекальные стрептококки, и дрожжи; они образуют точечные колонии. Положительную идентификацию Candida albicans можно проводить через 24–48 ч инкубации при 35–37 °C в атмосфере с 10 % CO₂. Для анализа могут использоваться образцы кала, выделения из ротовой полости и влагалища, соскобы с ногтей или кожи. Типичный вид колоний может варьировать.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-розового до фиолетового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: опалесцирующий гель красновато-фиолетового цвета с зеленоватым оттенком; в чашках Петри образуется мелкодисперсный осадок.
• pH после стерилизации при 25 °C: 7,1 ± 0,2.
• Контрольное значение pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Контроль стимуляции роста проводят в соответствии с Фармакопеей США (USP