Levine Eosin - метиленовый синий агаровая среда HiMedia MU022-100G (100 г)

Сухая селективно-дифференциальная агаровая среда Levine Eosin - метиленовый синий агаровая среда HiMedia MU022-100G (100 г) готовится из расчёта 37,46 г/л. Среда предназначена для выявления, подсчёта и дифференциации колиформных бактерий; эозин Y и метиленовый синий подавляют рост части грамположительных бактерий.

Назначение и принцип действия

Среду применяют для дифференциации Escherichia coli и Enterobacter aerogenes, а также для быстрого выявления Candida albicans. Американская ассоциация общественного здравоохранения (APHA) и Фармакопея США (USP) рекомендуют её для выявления, подсчёта и дифференциации бактерий группы колиформных.

Эозин Y и метиленовый синий придают среде слабую селективность и подавляют рост некоторых грамположительных бактерий. Оба красителя служат индикаторами и ингибирующими агентами, позволяющими различать бактерии, ферментирующие лактозу и не ферментирующие её. При кислой реакции эозин Y и метиленовый синий образуют комплекс, действующий как ингибирующий агент. Панкреатический перевар желатина обеспечивает среду необходимыми питательными веществами и факторами роста, а фосфат служит буфером.

Escherichia coli образует колонии с металлическим зелёным блеском, что указывает на интенсивную ферментацию лактозы. Уэлд предложил использовать агар Levine EMB с добавлением гидрохлорида хлортетрациклина для быстрого выявления Candida albicans в клинических образцах. На среде могут расти некоторые грамположительные бактерии, включая фекальные стрептококки, а также дрожжи; они образуют точечные колонии. Предварительную идентификацию Candida albicans в образцах кала, ротовых и вагинальных выделений, соскобах с ногтей или кожи проводят после инкубации в течение 24–48 ч при 35–37 °C в атмосфере с 10 % CO₂. Типичная морфология колоний может варьировать.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,46 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагревайте до кипения, чтобы полностью растворить среду.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин. Указанное давление — 15 фунтов на квадратный дюйм, приблизительно 0,103 МПа.
4. Не допускайте перегрева.
5. Охладите среду до 50 °C и встряхните, чтобы окислить метиленовый синий и восстановить его синюю окраску, а также суспендировать осадок, являющийся необходимой частью среды.
6. Тщательно перемешайте перед разливом в стерильные чашки Петри.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных показателей эффективности.

pH после стерилизации при 25 °C: 7,1 ± 0,2.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок светло-розового или фиолетового цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: красновато-фиолетовый опалесцирующий гель с зеленоватым оттенком и мелкодисперсным осадком в чашках Петри.
• pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Контроль роста проводят в соответствии с требованиями USP. Результаты учитывают после инкубации при 30–35 °C в течение 24–48 ч. За 100 % принимают восстановление бактерий на соево-казеиновом агаре, а грибов — на агаре Сабуро с декстрозой.