HiMedia MM1276-500G Разбавленная среда Соттона

Питательная среда HiMedia MM1276-500G Разбавленная среда Соттона — сухая порошкообразная среда массой 500 г для работы с микобактериями. Среда применяется для культивирования и количественного определения микобактерий, включая контроль вакцин известной активности; поставляется в виде компонентов Part A и Part B.

Назначение

Разбавленная среда Соттона рекомендована для культивирования и количественного определения микобактерий в соответствии с требованиями Индийской фармакопеи (IP). Тип образца: фармацевтическая проба.

Состав

Состав приведён для 1 л среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия заданным параметрам рабочих характеристик.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 2,52 г компонента Part A — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л — в 500 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте компонент Part A автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм, что соответствует приблизительно 0,103 МПа, при 121 °C в течение 20 мин.
4. Суспендируйте 0,667 г компонента Part B в 500 мл дистиллированной воды.
5. Стерилизуйте компонент Part B автоклавированием при 121 °C в течение 20 мин.
6. После автоклавирования асептически смешайте растворы Part A и Part B.
7. Охладите приготовленную среду до 45–50 °C.
8. Тщательно перемешайте и разлейте среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Указанная методика соответствует действующему на момент выпуска изданию фармакопеи. Установленный срок годности рассчитан с учётом этого издания; перед применением пользователь должен проверить совместимость методики с последним действующим изданием.

Принцип действия и интерпретация

Разбавленная среда Соттона используется для определения числа колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах с известной активностью согласно Индийской фармакопее. Цитрат аммония железа и сульфат магния обеспечивают неорганические ионы и источники азота, необходимые для роста микобактерий. Аспарагин способствует началу роста и увеличивает скорость роста. Глицерин выполняет функцию источника углерода.

Пробоподготовка и проведение анализа

Согласно методу Индийской фармакопеи, содержимое лиофилизированной вакцины для применения у человека восстанавливают разбавителем, указанным на флаконе.

1. Объедините содержимое 5 таких контейнеров с вакциной.
2. Приготовьте три разведения объединённой вакцины с использованием разбавленной среды Соттона. Разведения должны обеспечивать получение оптимально 100, 40 и 20 колоний при посевной дозе 0,2 мл.
3. По 0,2 мл каждого разведения внесите на поверхность скошенной части среды Левенштейна—Йенсена (L.J., MM162).
4. Инкубируйте посевы при 35–37 °C в течение 4–5 недель.
5. Вакцина соответствует испытанию, если в 0,1 мл восстановленной вакцины содержится от 1 × 10⁵ до 33 × 10⁵ колониеобразующих единиц.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

Контроль качества

Внешний вид

• Part A: однородный, свободно текучий порошок от кремового до почти белого цвета.
• Part B: однородный, свободно текучий порошок от белого до почти белого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная полная среда представляет собой светло-жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

pH

Диапазон pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивали на среде Левенштейна—Йенсена с использованием разбавленной среды Соттона в качестве разбавителя после инкубации при 35–37 °C в течение 4–5 недель.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения закрытого продукта: 10–30 °C.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–25 °C.
• Срок использования: до даты, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде в плотно закрытом флаконе.
• Плотно закрывайте флакон после каждого использования для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Ограничения применения

Для дальнейшей идентификации микроорганизмов необходимо провести дополнительные биохимические и серологические тесты.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Для выбора мер безопасности можно использовать соответствующие паспорта безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания. При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры; материалы, контактировавшие с образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.