HiMedia MM1276-100G Разбавленная среда Соттона

Разбавленная среда Соттона HiMedia MM1276-100G для культивирования и количественного определения микобактерий в соответствии с Индийской фармакопеей (IP). Применяется в качестве разбавителя для определения количества колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах с известной активностью.

Принцип измерения

Разбавленная среда Соттона используется для определения числа колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах. Соли, такие как цитрат аммония-железа и сульфат магния, обеспечивают наличие неорганических ионов и источников азота, необходимых для роста микобактерий. L-аспарагин добавлен для стимуляции инициации и увеличения скорости роста, а глицерол служит источником углерода.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и анализа

Приготовление среды

1. Часть А: Растворите 2,52 г (эквивалентный вес сухой среды на литр) части А в 500 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина. При необходимости нагрейте для полного растворения. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление $\approx$ 0,1 МПа / 15 psi) в течение 20 минут.
2. Часть B: Растворите 0,667 г части B в 500 мл дистиллированной воды. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 20 минут.
3. Смешивание: После автоклавирования асептически смешайте растворы части А и части B.
4. Розлив: Охладите до 45–50 °C, тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы.

Процедура анализа (согласно методу IP)

1. Содержимое лиофилизированной вакцины для людей восстанавливают разбавителем, указанным на флаконе.
2. Содержимое 5 таких контейнеров объединяют.
3. Готовят три разведения объединенной вакцины, используя разбавленную среду Соттона, чтобы получить оптимально 100, 40 и 20 колоний из посевной дозы 0,2 мл.
4. Посевную дозу 0,2 мл каждого разведения инокулируют на поверхность скоса среды Левенштейна-Йенсена (L.J. Medium, |MM162|) и инкубируют при 35–37 °C в течение 4–5 недель.
5. Вакцина проходит тест, если 0,1 мл восстановленной вакцины содержит от $1 \times 10^5$ до $33 \times 10^5$ КОЕ.

Технические характеристики

Контроль качества

• Внешний вид (Часть А): однородный свободнотекучий порошок от кремового до почти белого цвета.
• Внешний вид (Часть B): однородный свободнотекучий порошок от белого до почти белого цвета.
• Цвет и прозрачность: светло-желтый, прозрачный или слегка опалесцирующий раствор.

Культуральные характеристики

Культуральный ответ наблюдался на среде L.J. Medium с использованием разбавленной среды Соттона в качестве разбавителя после инкубации при 35–37 °C в течение 4–5 недель.

Область применения и ограничения

• Тип образца: фармацевтический образец.
• Ограничения: для окончательной идентификации необходимо проведение дополнительных биохимических и серологических тестов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухой среды: в плотно закрытом контейнере при температуре от +10 до +30 °C в сухом вентилируемом помещении, защищенном от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре +15…+25 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; неправильное хранение может привести к образованию комков.

Меры предосторожности и утилизация

• При работе использовать защитные перчатки, спецодежду и средства защиты глаз/лица.
• Соблюдать стандартные правила микробиологической безопасности.
• Контаминированные материалы и использованные препараты должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией.