HiMedia MM1276-100G Разбавленная среда Соттона

Питательная среда HiMedia MM1276-100G Разбавленная среда Соттона для культивирования и количественного определения микобактерий. Применяется при анализе фармацевтических образцов, включая вакцины, с приготовлением из двух компонентов и итоговым pH 7,2 ± 0,2 после стерилизации.

Назначение

Разбавленная среда Соттона предназначена для культивирования и количественного определения микобактерий в соответствии с Индийской фармакопеей (IP). Среда применяется для определения числа колониеобразующих единиц (КОЕ) в вакцинах с известной активностью.

Тип образца: фармацевтический образец.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

Принцип действия и интерпретация

Соли цитрата аммония-железа и сульфата магния обеспечивают неорганические ионы и источники азота, необходимые для роста микобактерий. Аспарагин способствует началу роста и увеличивает скорость роста. Глицерин в составе среды служит источником углерода.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 2,52 г части A, что соответствует массе обезвоженной среды на 1 л, в 500 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 20 мл глицерина.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте раствор автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 20 мин.
4. Суспендируйте 0,667 г части B в 500 мл дистиллированной воды.
5. Стерилизуйте раствор части B автоклавированием при температуре 121 °C в течение 20 мин.
6. После автоклавирования асептически смешайте растворы частей A и B.
7. Охладите полученную среду до 45–50 °C.
8. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Указания по приготовлению соответствуют действующей редакции фармакопеи. Указанный срок годности установлен с учётом этой редакции; пользователь должен проверить совместимость методики с последней редакцией фармакопеи.

Пробоподготовка и проведение анализа

В соответствии с методом Индийской фармакопеи содержимое лиофилизированной вакцины для человека восстанавливают растворителем, указанным на флаконе.

1. Объедините содержимое пяти таких контейнеров.
2. Приготовьте три разведения объединённой вакцины с использованием Разбавленной среды Соттона.
3. Подберите разведения для получения оптимального количества колоний — 100, 40 и 20 — при объёме посевного материала 0,2 мл.
4. Посейте по 0,2 мл каждого разведения на поверхность скошенной части среды Левенштейна—Йенсена (L.J. Medium, MM162).
5. Инкубируйте посевы при температуре 35–37 °C в течение 4–5 недель.
6. Вакцина соответствует требованиям испытания, если в 0,1 мл восстановленной вакцины содержится от 1 × 10⁵ до 33 × 10⁵ колониеобразующих единиц.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

• Часть A: однородный сыпучий порошок от кремового до почти белого цвета.
• Часть B: однородный сыпучий порошок от белого до почти белого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная полная среда представляет собой раствор светло-жёлтого цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Значение pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральную реакцию наблюдали на среде Левенштейна—Йенсена с использованием Разбавленной среды Соттона в качестве разбавителя после инкубации при температуре 35–37 °C в течение 4–5 недель.

Ограничения применения

Для дальнейшей идентификации необходимо выполнить дополнительные биохимические и серологические тесты.

Рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Хранение продукта: при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Хранение приготовленной среды: при температуре 15–25 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия: хранить продукт в сухом виде, плотно закрыв флакон, чтобы предотвратить образование комков вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Место хранения: сухая вентилируемая зона, защищённая от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования контейнер необходимо плотно закрывать.
• Наилучшие рабочие характеристики обеспечиваются при использовании в течение установленного срока годности.

В исходных данных производителя условие хранения также указано как «ниже 10–30 °C»; для карточки приведён температурный диапазон 10–30 °C, совпадающий с данными каталога.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Информацию по безопасности можно получить из соответствующих паспортов безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

Комплект поставки

• Часть A и часть B Разбавленной среды Соттона, общая масса 100 г.