Pseudomonas агаровая среда для Detection of Fluorescein среда 20 (In accordance с IP 2007) HiMedia MM120-500G (500 г)

Сухая агаровая питательная среда для выявления флуоресцеина, среда 20 по Индийской фармакопее 2007 года, HiMedia MM120-500G (500 г), предназначена для выявления продукции флуоресцеина бактериями рода Pseudomonas. Среду применяют в микробиологических испытаниях, в том числе при контроле микробной чистоты; она усиливает образование флуоресцеина и подавляет образование пиоцианина.

Назначение

Среда предназначена для выявления продукции флуоресцеина бактериями рода Pseudomonas. Состав соответствует Индийской фармакопее 2007 года и основан на формуле King et al. с модификациями, предусмотренными фармакопеей. Среду используют в испытаниях на микробную чистоту.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для достижения заданных характеристик.

Принцип действия

Флуоресцеин — водорастворимый, нерастворимый в хлороформе флуоресцентный пигмент, образуемый бактериями рода Pseudomonas. Среда способствует образованию флуоресцеина и подавляет образование пиоцианина. Пигмент диффундирует из колоний в агар и придаёт ему жёлтую флуоресценцию. Некоторые штаммы Pseudomonas образуют небольшое количество пиоцианина, из-за чего появляется жёлто-зелёное окрашивание.

В окружающей среде бактерии рода Pseudomonas широко распространены; они могут быть возбудителями ожоговых, кожных и внутрибольничных инфекций, а также загрязнителями фармацевтических и косметических препаратов. Штаммы Pseudomonas способны образовывать пигменты феназинового ряда: пиоцианин — сине-зелёный окислительно-восстановительный пигмент, пиорубин — ржаво-коричневый пигмент, оксифеназин — продукт распада пиоцианина, и пио­вердин, также называемый флуоресцеином, — водорастворимый жёлто-зелёный пигмент.

Ферментативный гидролизат казеина и пептический гидролизат животных тканей обеспечивают бактерии азотсодержащими питательными веществами, углеродом, серой и микроэлементами; эти компоненты также способствуют образованию флуоресцеина. Пептон и фосфор усиливают выработку пио­вердина/флуоресцеина. Гидрофосфат калия буферирует среду, а сульфат магния обеспечивает катионы, необходимые для активации образования флуоресцеина.

Наличие Pseudomonas подтверждают положительной оксидазной пробой.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 37,23 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл глицерина.
2. Нагревайте до кипения, пока среда полностью не растворится.
3. Стерилизуйте в автоклаве при 121 °C в течение 15 мин; указанное давление 15 фунтов на квадратный дюйм соответствует приблизительно 0,103 МПа.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,5 % агара.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: жёлтый прозрачный или слегка опалесцирующий гель в чашках Петри.
• pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Ростовые свойства оценивают в соответствии с гармонизированным методом Индийской фармакопеи. Для оценки восстановления культуры инкубируют при 33–37 °C не менее 3 дней; за 100 % принимают рост бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина.

Для среды MM120 культуральные характеристики наблюдают после инкубации при 33–37 °C в течение 18–48 ч. Восстановление рассчитывают относительно роста бактерий на агаре с переваром соевых бобов и казеина, принимаемого за 100 %.

Концентрация солей выше 2 % влияет на образование пигмента. Ультрафиолетовое освещение может оказывать бактерицидное действие, поэтому перед облучением культуры необходимо убедиться в достаточном росте.

Условия хранения

• Сухая среда: хранить в плотно закрытой упаковке при температуре ниже 30 °C.
• Приготовленная среда: хранить при 2–8 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Технические характеристики