Zinc краситель-Destain набор HiMedia ML124-1PK (1 уп.)

Набор для окрашивания и обесцвечивания белков Zinc краситель-Destain набор HiMedia ML124-1PK (1 уп.) предназначен для выявления белковых полос в полиакриламидных гелях с помощью обратимого цинкового окрашивания. Набор применяют после электрофореза в нативных и денатурирующих гелях; после обесцвечивания гель можно использовать для иммуноблоттинга и других анализов.

Принцип окрашивания

Цинковое окрашивание основано на взаимодействии ионов цинка с белковыми полосами и полиакриламидным гелем. Осаждение металлического цинка делает гель непрозрачно-белым, а покрытие белков додецилсульфатом натрия (SDS) препятствует связыванию красителя с белками. В результате образуется негативное изображение геля: белковые полосы видны тёмными на непрозрачном белом фоне.

Окрашивание совместимо с нативными и денатурирующими гелями. Для визуализации полос обесцвечивание не требуется. После обработки раствором для обесцвечивания белковые полосы полностью исчезают, а гель можно использовать для последующего переноса белков.

Подготовка растворов

Перед экспериментом разбавьте каждый раствор с концентрацией 10X до 1X: смешайте одну часть раствора с девятью частями воды для молекулярной биологии ML064.

Методика окрашивания цинком

1. После завершения электрофореза в полиакриламидном геле с SDS перенесите гель в ёмкость с 50 мл разбавленного до 1X раствора для окрашивания I.
2. Выдержите гель при комнатной температуре 10 мин при осторожном покачивании.
3. Перенесите гель в другую ёмкость с 50 мл разбавленного раствора для окрашивания II. Убедитесь, что гель полностью погружён в раствор.
4. В течение нескольких секунд на молочно-белом фоне появятся тёмные белковые полосы.
5. Удалите раствор для окрашивания II и поместите гель в дистиллированную воду.
6. Для визуализации поместите гель на тёмный фон: белковые полосы будут видны как тёмные участки на непрозрачном белом фоне.
7. Гель также можно визуализировать под УФ-светом: комплекс цинка с имидазолом флуоресцирует под УФ-излучением.

Методика обесцвечивания цинкового окрашивания

1. После завершения окрашивания полностью погрузите гель в раствор для обесцвечивания, предварительно разбавленный до 1X.
2. Выдержите гель при комнатной температуре 5 мин при осторожном покачивании.
3. Удалите раствор, добавьте свежий раствор для обесцвечивания и осторожно перемешивайте 10 мин. За это время белковые полосы полностью обесцвечиваются.
4. После обесцвечивания гель готов к окрашиванию Кумасси, вестерн-блоттингу и другим анализам.
5. Интересующий белок можно вырезать из геля после обесцвечивания и направить на идентификацию методом MALDI-TOF. Такое применение позволяет избежать помех, наблюдаемых при использовании других конечных методов окрашивания белков, например Кумасси и серебром.

Комплект поставки

Идентификация продукта

Технические характеристики

Условия хранения и срок стабильности

Условия хранения набора: комнатная температура, 15–25 °C. При соблюдении рекомендованных условий хранения продукт стабилен в течение 12 месяцев.

Ограничения применения и безопасность

Набор предназначен только для лабораторного, исследовательского применения и использования in vitro. Не применять для диагностики у человека, производства лекарственных средств, бытовых целей или введения человеку.

Не используйте продукт, если упаковка повреждена. При работе соблюдайте надлежащие практики клинической лаборатории и стандартные меры предосторожности при обращении с клиническими образцами. Информацию об опасностях и безопасном обращении см. в паспорте безопасности продукта.

Ожидаемые характеристики продукта обеспечиваются при хранении в рекомендованном температурном диапазоне и использовании в пределах срока годности.