Реактив Бредфорда HiMedia ML106-500ML (500 мл)

Реактив для определения белка «Реактив Бредфорда HiMedia ML106-500ML (500 мл)» содержит краситель бриллиантовый синий Кумасси G-250, максимум поглощения которого в несвязанном состоянии составляет 465 нм. Реактив применяется для количественного определения белка по изменению максимума поглощения до 595 нм после связывания красителя с белком; окрашенный комплекс формируется в течение 5 мин и сохраняется стабильным 1 ч.

Назначение

Реактив Бредфорда используется для быстрой оценки содержания белка при молекулярно-биологических исследованиях и для количественного определения белка в рутинной лабораторной практике.

Принцип измерения

Реактив содержит краситель бриллиантовый синий Кумасси G-250. В несвязанном состоянии максимум поглощения красителя находится на длине волны 465 нм.

Метод определения белка основан на образовании комплексов между бриллиантовым синим Кумасси G-250 и белковыми образцами в растворе. При связывании белкового образца с красителем цвет раствора изменяется с коричневого на синий, а максимум поглощения красителя смещается с 465 до 595 нм.

Связывание красителя происходит с участием основных аминокислотных остатков. Образовавшийся синий комплекс формируется в течение 5 мин и остаётся стабильным в течение 1 ч.

Методика количественного определения белка

1. Подготовьте неизвестный белковый образец в растворе.
2. Проведите серию стандартных разведений белка.
3. Выполните анализ стандартных разведений и неизвестного образца одновременно.
4. Измерьте значения поглощения для стандартных разведений и неизвестного образца при длине волны 595 нм.
5. Постройте стандартную кривую по значениям поглощения, полученным для серии стандартных разведений белка.
6. Определите концентрацию неизвестного белкового образца по его значению поглощения, используя стандартную кривую.

Технические характеристики

• Наименование: Реактив Бредфорда
• Артикул: ML106-500ML
• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: Среда
• Объём: 500 мл
• Краситель: бриллиантовый синий Кумасси G-250
• Максимум поглощения красителя в несвязанном состоянии: 465 нм
• Максимум поглощения красителя после связывания с белком: 595 нм
• Время формирования комплекса: 5 мин
• Стабильность образовавшегося синего комплекса: 1 ч
• Изменение окраски раствора: с коричневой на синюю
• Основа определения: связывание красителя с основными аминокислотными остатками белка
• Метод расчёта концентрации неизвестного образца: по стандартной кривой, построенной по значениям поглощения серии стандартных разведений белка, исследованных одновременно с неизвестным образцом

Область применения

• Молекулярно-биологические исследования белков.
• Рутинное лабораторное количественное определение белка в растворах.
• Быстрая оценка концентрации неизвестных белковых образцов по стандартной кривой.