Реактив Бредфорда HiMedia ML106-500ML (500 мл)

Реактив Бредфорда HiMedia ML106-500ML (500 мл) для количественного определения белков. Применяется в молекулярных исследованиях и рутинном лабораторном анализе для экспресс-оценки концентрации белка в растворах.

Принцип измерения

Метод основан на использовании красителя Кумасси бриллиантовый синий G-250 (Coomassie brilliant Blue G-250). В свободном состоянии краситель имеет максимум поглощения на длине волны 465 нм. При взаимодействии с образцом белка в растворе образуются комплексы, в результате чего цвет раствора меняется с коричневого на синий, а максимум поглощения смещается с 465 нм до 595 нм. Связывание красителя происходит за счёт взаимодействия с остатками основных аминокислот.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте серию разведений стандартного белка для построения калибровочной кривой.
2. Добавьте реактив Бредфорда к стандартным образцам и к исследуемому образцу белка.
3. Выдержите пробу до завершения реакции связывания красителя (процедура занимает до 5 минут).
4. Измерьте оптическую плотность полученных растворов при длине волны 595 нм. Образовавшийся синий комплекс стабилен в течение одного часа.
5. Постройте стандартную кривую по значениям абсорбции стандартных разведений.
6. Определите концентрацию белка в неизвестном образце, сопоставив его значение абсорбции с полученной кривой.

Технические характеристики

• Объем: 500 мл
• Основной компонент: краситель Кумасси бриллиантовый синий G-250
• Длина волны максимума поглощения (свободный краситель): 465 нм
• Длина волны максимума поглощения (белковый комплекс): 595 нм
• Время завершения реакции: до 5 минут
• Стабильность окрашенного комплекса: 1 час