5X белок Loading буфер (Non-Reducing) HiMedia ML097-5ML (5 мл)

Буфер для загрузки белковых образцов 5X (невосстанавливающий) HiMedia ML097-5ML (5 мл) — лабораторный буфер с розовым красителем-маркером. Применяется при электрофорезе в денатурирующих гелях и иммуноблоттинге; перед использованием концентрат смешивают с образцом в соотношении 1:4.

Назначение и свойства

Буфер предназначен для подготовки белковых образцов к электрофорезу в полиакриламидном геле с додецилсульфатом натрия (SDS-PAGE) и иммуноблоттингу. Состав не содержит восстановителя. Розовый краситель-маркер заменяет бромфеноловый синий и позволяет отслеживать фронт электрофореза.

Красная полоса красителя перемещается с фронтом красителя при SDS-PAGE и полностью переносится на нитроцеллюлозную мембрану при иммуноблоттинге. Видимая полоса помогает оценивать эффективность переноса и совмещать участки при разрезании мембраны. Краситель переносится и связывается только с нитроцеллюлозой; он не переносится и не связывается с нейлоновыми мембранами и мембранами из ПВДФ. Краситель обладает собственной флуоресценцией и может мешать флуоресцентному детектированию.

Буфер подходит для денатурирующих гелей и совместим с окрашиванием кумасси и серебром, а также с иммуноблоттингом. Концентрация 5X позволяет загружать в лунку больший объём образца, чем традиционный буфер 2X. Содержащийся в составе додецилсульфат натрия (SDS) необходим для разрушения структур белка высшего порядка; глицерин обеспечивает внесение образца в лунку геля.

Состав

• Трис-HCl: 0,3 М
• SDS: 5 %
• Глицерин: 50 %
• Розовый краситель-маркер: состав не раскрыт производителем

Методика подготовки образца и электрофореза

1. Доведите буфер до комнатной температуры.
2. Смешайте 1 объём буфера с 4 объёмами белкового образца.
3. Кипятите образец в течение 3–5 мин.
4. Быстро охладите на льду. Центрифугируйте при 10 000 об/мин в течение 1 мин.
5. Внесите образец в гель и проведите электрофорез.
6. Остановите электрофорез, когда розовый краситель-маркер достигнет нижнего края геля.

Технические характеристики

Условия хранения и безопасность

• Температура хранения: 15–25 °C
• Срок стабильности: 12 месяцев при соблюдении рекомендованных условий хранения
• Ожидаемые характеристики сохраняются при хранении в рекомендованном температурном диапазоне и в пределах срока годности.
• Только для лабораторного применения; не предназначен для медицинского, лекарственного, бытового и иного использования.
• Перед началом работы ознакомьтесь с паспортом безопасности (SDS).
• При работе используйте защитные перчатки, одежду и средства защиты глаз и лица; при обращении с реагентом также соблюдайте лабораторные меры безопасности, включая использование защитных очков.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте надлежащую практику клинической лаборатории и стандартные меры предосторожности согласно установленным рекомендациям.
• Несовместим с дезинфицирующими средствами, содержащими отбеливатель. Сведения об опасностях и безопасном обращении приведены в паспорте безопасности.