5X белок Loading буфер (Reducing) HiMedia ML096-5ML (5 мл)

Восстанавливающий 5-кратный буфер для загрузки белка HiMedia ML096-5ML (5 мл) — лабораторный реагент с розовым красителем для отслеживания фронта электрофореза. Применяется при электрофорезе в полиакриламидном геле в присутствии додецилсульфата натрия (SDS-PAGE) и вестерн-блоттинге; краситель переносится и связывается с нитроцеллюлозной мембраной, но не с нейлоновой или PVDF-мембраной.

Идентификация продукта

Назначение и принцип действия

Буфер используют для подготовки белковых образцов к денатурирующему гель-электрофорезу и вестерн-блоттингу. В состав входят додецилсульфат натрия (SDS) и дитиотреитол (DTT), необходимые для разрушения структур высшего порядка белков, а также глицерин, обеспечивающий загрузку образца в лунку геля.

Розовый краситель движется вместе с фронтом электрофореза и полностью переносится на нитроцеллюлозную мембрану при вестерн-блоттинге. Видимая полоса помогает оценивать эффективность переноса белка и совмещать участки разрезанной мембраны. Буфер имеет концентрацию 5X, что позволяет загружать в лунку больший объём образца, чем при использовании стандартного буфера 2X.

Область применения и ограничения

Буфер подходит для денатурирующих гелей, окрашивания кумасси и серебром, а также для вестерн-блоттинга. Краситель переносится и связывается только с нитроцеллюлозой; он не переносится и не связывается с нейлоновыми или PVDF-мембранами. Краситель обладает автофлуоресценцией и может мешать методам регистрации флуоресценции.

Методика подготовки образца

1. Доведите 5-кратный буфер для загрузки белка до комнатной температуры.
2. Смешайте 1 объём буфера с 4 объёмами белкового образца.
3. Кипятите образец в течение 3–5 мин.
4. Быстро охладите на льду. Центрифугируйте при 10 000 об/мин в течение 1 мин.
5. Внесите образец в лунку геля и выполните электрофорез.
6. Завершите электрофорез, когда розовый краситель достигнет нижнего края геля.

Технические характеристики

Условия хранения

Хранить при −20 °C. После первого размораживания разделить маточный раствор на аликвоты для однократного использования. При соблюдении рекомендованных условий хранения реагент стабилен в течение 12 месяцев. Не использовать продукт, если упаковка повреждена.

Безопасность

Продукт предназначен только для лабораторного применения; не использовать в медицинских, бытовых и иных целях. Перед началом работы ознакомьтесь с паспортом безопасности реагента. При работе используйте лабораторные меры защиты, включая перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При обращении с клиническими образцами соблюдайте надлежащие практики клинической лаборатории и установленные стандартные меры предосторожности. Не применять совместно с дезинфицирующими средствами, содержащими отбеливатель. Информация об опасностях и безопасном обращении приведена в паспорте безопасности.

Контроль качества

Заявленные рабочие характеристики обеспечиваются при хранении раствора при рекомендованной температуре и использовании в пределах срока годности.

Характеристики упаковки