Раствор акриламида/бис-акриламида 30% (29:1) HiMedia ML037-100ML (100 мл) — готовый к применению реагент для приготовления полиакриламидных гелей. Реагент используют для электрофоретического разделения белков и нуклеиновых кислот; хранить его следует при 2–8 °C, защищая от света.
Назначение и принцип применения
Раствор используют для приготовления полиакриламидных гелей для электрофореза белков и нуклеиновых кислот. При электрофорезе заряженные молекулы перемещаются через матрицу под действием электрического поля; полиакриламидная матрица применяется для разделения белков и нуклеиновых кислот по размеру.
Гель формируется в результате радикальной полимеризации акриламида с поперечным сшиванием бис-акриламидом (N,N′-метиленбисакриламидом). Мономеры акриламида образуют длинные цепи в реакции, инициируемой системой генерации свободных радикалов; бис-акриламид связывает цепи, формируя гель. Акриламид — потенциально опасное химическое соединение; готовый раствор снижает риски образования пыли, вдыхания и контакта, связанные с взвешиванием и приготовлением растворов из порошков акриламида и бис-акриламида.
Приготовление гелей
Разрешающий гель для Tris-глицин-SDS-PAGE, 10 мл
| Компонент | 8 % | 10 % | 12 % |
|---|
| 30%-й раствор акриламида/бис-акриламида (29:1) | 2,7 мл | 3,3 мл | 4 мл |
| Буфер Tris 1,5 M (pH 8,8) | 2,5 мл | 2,5 мл | 2,5 мл |
| SDS 10 % | 0,1 мл | 0,1 мл | 0,1 мл |
| Вода | 4,6 мл | 4,0 мл | 3,3 мл |
| Персульфат аммония 10 % | 100 мкл | 100 мкл | 100 мкл |
| TEMED | 6 мкл | 6 мкл | 6 мкл |
Концентрирующий гель для Tris-глицин-SDS-PAGE, 5 мл
| Компонент | 5 % |
|---|
| 30%-й раствор акриламида/бис-акриламида (29:1) | 0,833 мл |
| Буфер Tris 1 M (pH 6,8) | 0,625 мл |
| SDS 10 % | 50 мкл |
| Вода | 3,442 мл |
| Персульфат аммония 10 % | 50 мкл |
| TEMED | 4 мкл |
Рекомендуемые буферы: ML191 — буфер Tris 1,5 M, pH 8,8; ML190 — буфер Tris 1 M, pH 6,8.
Раствор также можно использовать с готовыми буферами Tris-SDS HiMedia: ML039, pH 8,8, и ML040, pH 6,8.
Разрешающий гель с буфером ML039, 10 мл
| Компонент | 8 % | 10 % | 12 % |
|---|
| 30%-й раствор акриламида/бис-акриламида (29:1) | 2,66 мл | 3,33 мл | 4 мл |
| Буфер Tris-SDS 2,5X (pH 8,8) [ML039] | 4 мл | 4 мл | 4 мл |
| Вода | 3,24 мл | 2,57 мл | 1,9 мл |
| Персульфат аммония 10 % | 100 мкл | 100 мкл | 100 мкл |
| TEMED | 6 мкл | 6 мкл | 6 мкл |
Концентрирующий гель с буфером ML040, 5 мл
| Компонент | 5 % |
|---|
| 30%-й раствор акриламида/бис-акриламида (29:1) | 0,833 мл |
| Буфер Tris-SDS 5X (pH 6,8) [ML040] | 1 мл |
| Вода | 3,117 мл |
| Персульфат аммония 10 % | 50 мкл |
| TEMED | 4 мкл |
Состав и свойства
Раствор приготовлен из акриламида и бис-акриламида высокой чистоты, без нуклеаз, качества для электрофореза, в сверхчистой воде; готовый раствор фильтруют через фильтр 0,2 мкм. Концентрация 30 % рассчитана от общей массы акриламида и бис-акриламида, смешанных в соотношении 29:1.
| Параметр | Значение |
|---|
| Внешний вид | Бесцветный раствор |
| Прозрачность | Прозрачный, без частиц |
| ДНКазы и РНКазы | Не обнаружены |
| Проверка пригодности | Раствор проверен и пригоден для применения в полиакриламидном гель-электрофорезе (PAGE) |
Технические характеристики
| Параметр | Значение |
|---|
| Фасовка | 100 мл, 500 мл |
| Артикулы | ML037-100ML, ML037-500ML |
Условия хранения и безопасность
- Хранение: при 2–8 °C, с защитой от света.
- Срок стабильности: 12 месяцев при рекомендованных условиях хранения.
- Рабочие характеристики раствора ожидаются при соблюдении рекомендованной температуры хранения и использовании до истечения срока годности.
- Только для лабораторного применения; не предназначен для медицинского, лекарственного, бытового или иного использования.
- Перед началом работы изучите паспорт безопасности реагента. При обращении используйте защитные перчатки, одежду, очки и защиту лица; соблюдайте лабораторные меры безопасности.
- При работе с клиническими образцами соблюдайте надлежащую практику клинической лаборатории и установленные стандартные меры предосторожности.
- Раствор несовместим с дезинфицирующими средствами, содержащими отбеливатель.
- Информацию об опасностях и безопасном обращении смотрите в паспорте безопасности реагента.