HiMedia MH1491-5KG Среда Раппапорта-Вассилиадиса для обогащения сальмонелл

Питательная среда HiMedia MH1491-5KG Среда Раппапорта-Вассилиадиса для обогащения сальмонелл — порошковая селективная среда для микробиологического контроля фармацевтических образцов. Среда предназначена для селективного обогащения Salmonella при дозировке 27,11 г обезвоженной среды на 1 л воды; перегрев может снизить селективность.

Назначение

Среда Раппапорта–Вассилиадиса предназначена для селективного обогащения видов Salmonella из фармацевтических образцов при микробиологическом испытании на соответствие требованиям гармонизированной методики USP/EP/BP/JP/IP. Среда также может применяться для прямого обогащения проб с низкой посевной дозой.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Принцип действия и интерпретация

Среда разработана на основе пересмотренной рецептуры Van Schothorst и соавторов и представляет собой модификацию бульона для обогащения по Раппапорту–Вассилиадису, описанного Van Schothorst и Renauld. Рецептура подготовлена в соответствии с гармонизированной методикой USP/EP/BP/JP/IP.

Селективность среды основана на физиологических свойствах Salmonella:

• Salmonella обычно сохраняет жизнеспособность при несколько повышенном осмотическом давлении;
• Salmonella способна расти при несколько пониженном pH;
• Salmonella более устойчива к малахитовому зелёному по сравнению с другими бактериями.

Механизм действия компонентов:

• хлорид магния повышает осмотическое давление среды;
• природные сахара соевого пептона обеспечивают необходимые питательные вещества и усиливают рост Salmonella;
• фосфатная буферная система поддерживает постоянное значение pH;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• малахитовый зелёный подавляет рост многих грамположительных бактерий и одновременно обеспечивает селективное обогащение Salmonella;
• относительно низкая концентрация питательных компонентов дополнительно способствует селективному обогащению Salmonella.

Сообщалось о возможности выделения Salmonella из фекалий человека без предварительного обогащения при использовании этой среды.

Обогащённую культуру из бульона для обогащения Salmonella по Раппапорту–Вассилиадису MH1491 можно пересевать для дальнейшего выделения на ксилозо-лизин-дезоксихолатный агар MH031.

Методика приготовления

1. Взвесьте 27,11 г обезвоженной среды — эквивалентную массу на 1 л готовой среды.
2. Внесите среду в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. При необходимости нагрейте суспензию для полного растворения среды.
4. Разлейте приготовленную среду в пробирки или другие подходящие ёмкости в требуемом объёме.
5. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C либо по валидированному циклу стерилизации.

Перегрев среды может привести к разрушению её селективных свойств.

Сбор и обращение с образцами

При работе с фармацевтическими образцами применяйте соответствующие методы обращения с пробами в соответствии с установленными руководствами и утверждёнными лабораторными процедурами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный, сыпучий порошок от светло-жёлтого до светло-синего цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Приготовленная среда представляет собой прозрачный или слегка опалесцирующий раствор зеленовато-синего цвета с небольшим осадком в пробирках.

Водородный показатель

pH приготовленной среды: 5,00–5,40.

Культуральная реакция

Стимуляцию роста проводят в соответствии с гармонизированной методикой USP/BP/EP/JP/IP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени.

Восстановление культуры выполняют на ксилозо-лизин-дезоксихолатном агаре MH031 после обогащения в бульоне для обогащения Salmonella по Раппапорту–Вассилиадису.

Стимулирующие рост свойства: отчётливо видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды, при заданной температуре за период, не превышающий минимально установленный. Посевная доза — ≤100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Ингибирующие свойства: отсутствие роста тестового микроорганизма при заданной температуре в течение периода, не меньшего максимально установленного. Посевная доза — ≥100 КОЕ; условия испытания — 30–35 °C в течение ≥24 ч.