HiMedia MH1491-100G Среда Раппапорта-Вассилиадиса для обогащения сальмонелл

Питательная среда HiMedia MH1491-100G «Среда Раппапорта—Вассилиадиса для обогащения сальмонелл» производства HiMedia предназначена для селективного обогащения видов Salmonella и имеет форму порошка. Среда применяется при микробиологическом контроле фармацевтических образцов, при этом перегрев может уничтожить её селективные свойства.

Назначение

Среда Раппапорта—Вассилиадиса для обогащения сальмонелл предназначена для селективного обогащения видов Salmonella из фармацевтических препаратов при микробиологическом контроле по гармонизированной методике USP/EP/BP/JP/IP. Среда также может применяться для прямого обогащения образцов с низкой посевной дозой.

Тип образца: фармацевтические образцы.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных параметров эффективности.

Методика приготовления

1. Взвесьте 27,11 г сухой среды — эквивалентное количество обезвоженной среды на 1 л — и суспендируйте в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор для полного растворения среды.
3. Разлейте среду в пробирки в требуемом объёме.
4. Стерилизуйте автоклавированием при 115 °C либо по валидированному циклу стерилизации.

Принцип действия и интерпретация

Среда разработана в соответствии с пересмотренной рецептурой Van Schothorst и соавторов и предназначена для селективного обогащения Salmonella из фармацевтических препаратов. Среда представляет собой модификацию бульона для обогащения Salmonella по Rappaport—Vassiliadis, описанного Van Schothorst и Renauld.

Рецептура подготовлена в соответствии с гармонизированной методологией USP/EP/BP/JP/IP. Добавление хлорида магния в состав среды описано Peterz и соавторами.

Виды Salmonella могут быть выделены из человеческих фекалий без предварительного обогащения с использованием этой среды. По сравнению с другими бактериями Salmonella обычно:

• выживают при несколько повышенном осмотическом давлении;
• растут при несколько пониженном pH;
• устойчивы к малахитовому зелёному.

Эти свойства используются для селективного обогащения Salmonella:

• хлорид магния повышает осмотическое давление среды;
• природные сахара соевого пептона обеспечивают необходимые питательные вещества и усиливают рост Salmonella;
• фосфат выполняет буферную функцию и поддерживает постоянный pH;
• хлорид натрия поддерживает осмотический баланс;
• малахитовый зелёный подавляет рост многих грамположительных бактерий и одновременно обеспечивает селективное обогащение Salmonella;
• относительно низкая концентрация питательных веществ также способствует селективному обогащению Salmonella.

Сообщалось, что среда превосходит такие селективные среды для Salmonella, как тиосульфатный бульон и селенитовый обогатительный бульон, а также тиосульфатно-бриллиантово-зелёный бульон, при обнаружении Salmonella в образцах молока.

После обогащения в бульоне для обогащения Salmonella Rappaport—Vassiliadis (MH1491) культуру можно пересевать для дальнейшего выращивания и выделения на ксилозо-лизин-дезоксихолатном агаре (MH031).

Сбор и обращение с образцами

При работе с фармацевтическими образцами используйте соответствующие методы обращения с образцами согласно установленным руководствам и методикам. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Перегрев может уничтожить селективность среды.

Условия эффективности

Эффективность среды обеспечивается при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или светло-голубой однородный сыпучий порошок.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный или слегка опалесцирующий раствор зелёно-голубого цвета с небольшим осадком в пробирках.

pH

pH: 5,00–5,40.

Культуральная реакция

Испытание стимулирующих рост свойств выполняют в соответствии с гармонизированной методологией USP/BP/EP/JP/IP. Культуральную реакцию оценивают после инкубации при 30–35 °C в течение установленного времени. Восстановление проводят на ксилозо-лизин-дезоксихолатном агаре (MH031) после обогащения в бульоне для обогащения Salmonella Rappaport—Vassiliadis.

Свойства, стимулирующие рост

Чётко видимый рост микроорганизма, сопоставимый с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды, должен наблюдаться при установленной температуре в течение периода, не превышающего минимально установленное время, при внесении посевной дозы ≤100 КОЕ: при 30–35 °C в течение ≤18 ч.

Ингибирующие свойства

Рост тестируемого микроорганизма не должен наблюдаться при установленной температуре в течение периода, не меньшего максимально установленного времени, при внесении посевной дозы ≥100 КОЕ: при 30–35 °C в течение ≥24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

• Ранее назывался Pseudomonas aeruginosa.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой среды: 10–30 °C.
• Условия хранения сухой среды: плотно закрытый контейнер.
• Температура хранения приготовленной среды: 15–30 °C.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде, чтобы предотвратить образование комков из-за гигроскопичности.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Хранить в сухом пров