HiMedia MF034-20PT Хромогенная колиформная среда (без мембранного фильтра) (20 планшетов)

Хромогенная колиформная среда HiMedia MF034-20PT (без мембранного фильтра) в формате 20 планшетов. Рекомендуется для одновременного обнаружения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды и сточных вод.

Принцип измерения

Среда HiCrome™ Chromogenic Agar является селективной и содержит три хромогенных субстрата для дифференциации микроорганизмов:

• Фермент $\beta$-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформами, расщепляет 6-хлоро-3-индокси-1-$\beta$-D-галактопиранозид, что приводит к образованию колоний розового или красного цвета.
• Фермент $\beta$-D-глюкуронидаза, вырабатываемый E. coli, расщепляет 5-бром-4-хлоро-3-индокси-1-$\beta$-D-глюкуроновую кислоту.
• Колонии E. coli приобретают тёмно-синий или фиолетовый цвет благодаря расщеплению обоих хромогенов.

Третий хромоген (IPTG) усиливает цветную реакцию, а добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, повышая надёжность идентификации. Триптон, пируват натрия и сорбитол обеспечивают азотистые вещества, ферментируемые углеводы и другие питательные компоненты. Фосфаты поддерживают pH среды. Тергитол-7 подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Для анализа используется метод мембранной фильтрации:

1. Проба воды фильтруется через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм или 0,45 мкм.
2. Питательная подушка (nutrient pad) регидратируется добавлением 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. Стерильным пинцетом мембранный фильтр асептически извлекается из установки и помещается на регидратированную питательную подушку.
4. Инокулированный планшет инкубируют при температуре 35–37 °C в течение 18–24 часов.
5. Результаты интерпретируют качественно (наличие/отсутствие роста) и количественно (подсчёт колоний на поверхности фильтра для расчёта КОЕ/мл).

Для подтверждения E. coli на тёмно-синие или фиолетовые колонии наносят каплю реактива Ковача: образование вишнёво-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

• Тип среды: готовая к использованию стерильная питательная подушка (диаметр 50 мм) в чашке Петри (диаметр 55 мм).
• Назначение: обнаружение E. coli и общих колиформ.
• Тип образцов: вода, сточные воды.
• Особенности: биоинертный абсорбирующий материал, исключающий необходимость приготовления сред и автоклавирования.

Контроль качества

• Внешний вид: сухая подушка с мембранным фильтром диаметром 50 мм.
• Цвет: бледно-окрашенная питательная подушка.
• Стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 часов.

* Соответствующие номера WDCM. Примечание: Klebsiella aerogenes ранее была известна как Enterobacter aerogenes.

Ограничения и предостережения

• Для окончательной идентификации микроорганизмов требуется проведение дополнительных биохимических тестов.
• Допускаются незначительные вариации в окраске колоний.
• Работа со средой должна осуществляться только обученным персоналом с использованием средств индивидуальной защиты (перчатки, одежда, защита глаз и лица).

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение при получении: 2–8 °C.
• Использовать до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• Утилизация: использованные материалы подлежат обязательному автоклавированию или сжиганию в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.