HiMedia MF027-50PT M-E. coli среда (50 планшетов)

Питательная микробиологическая среда HiMedia MF027-50PT M-E. coli среда (50 планшетов) производства HiMedia — стерильные готовые к применению питательные планшеты для хромогенного выявления и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli. Среда предназначена для анализа проб воды методом мембранной фильтрации с использованием мембранного фильтра с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.

Назначение

Среда рекомендована для выявления и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli на основании хромогенной дифференциации.

Тип образца: пробы воды.

Принцип измерения и интерпретация результатов

Питательная среда в формате DriFilter представляет собой готовую к применению стерильную культуральную среду в виде биологически инертных абсорбирующих планшетов диаметром 50 мм, пропитанных средой Сабуро с декстрозой, высушенных и стерилизованных в чашке Петри диаметром 55 мм. Использование питательных планшетов исключает трудоёмкое приготовление среды и автоклавирование. Перед применением планшет смачивают стерильной дистиллированной или очищенной водой.

Питательные планшеты позволяют одновременно исследовать большие объёмы образца. Результат интерпретируют непосредственно по количеству колониеобразующих единиц (КОЕ), что также позволяет определить микробную нагрузку образца.

Среда M-E. coli применяется для выявления и дифференциации Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды методом мембранной фильтрации. Принцип основан на использовании триптон-жёлчного агара, применяемого для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах (1), при котором восстановление Escherichia coli происходит быстрее, надёжнее и точнее.

Пробу воды фильтруют через мембрану, после чего мембрану помещают на планшет, насыщенный бульоном M-E. coli, и инкубируют при 37 °C в герметично закрытой чашке Петри. Среда содержит хромогенную смесь для выявления активности β-глюкуронидазы Escherichia coli (3). Этот специфический фермент позволяет дифференцировать Escherichia coli от других колиформных бактерий.

Клетки Escherichia coli расщепляют хромогенную смесь с помощью β-глюкуронидазы, в результате чего колонии приобретают синее окрашивание. Колиформные бактерии, отличные от Escherichia coli, окрашиваются в красный цвет вследствие восстановления ТТС — хлорида 2,3,5-трифенилтетразолия (2,3). Получаемое различие окраски позволяет интерпретировать результаты без дополнительного подтверждения. Триптон обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами. Жёлчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

1. Отфильтруйте исследуемую пробу через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.
2. Регидратируйте питательный планшет, добавив 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на регидратированный питательный планшет.
5. Инкубируйте засеянный питательный планшет.
6. Проведите качественную интерпретацию результата по наличию или отсутствию роста.
7. Проведите количественную интерпретацию, подсчитав количество колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитав содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.

Требования к образцам и обращению

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов согласно действующим руководствам и местным нормативным требованиям (2).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Руководства по безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов Escherichia coli, однако отдельные штаммы Escherichia coli могут быть отрицательными по этому признаку.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: сухой фильтрационный мембранный планшет диаметром 50 мм.

Цвет

Цвет: питательный планшет от светлого до жёлтого.

Испытание на стерильность

Результат: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию проводят 48 ч.

Примечание: * соответствующие номера WDCM.

Условия хранения и срок годности

Условия хранения при получении: 2–8 °C.

Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.

Рабочие характеристики среды сохраняются оптимально при использовании в течение установленного срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных к применению препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры