HiMedia MF027-20PT M-E. coli среда (20 планшетов)

Питательная среда HiMedia MF027-20PT M-E. coli среда (20 планшетов) — стерильные сухие питательные планшеты для хромогенного выявления и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli. Применяется для анализа проб воды мембранно-фильтрационным методом с использованием стерильных мембранных фильтров с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.

Назначение

Среда предназначена для выявления и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli на основе хромогенной дифференциации.

Принцип измерения и интерпретации

Среда для питательных планшетов мембранной фильтрации DriFilter представляет собой готовую к применению стерильную питательную среду в форме биологически инертных абсорбирующих планшетов диаметром 50 мм, пропитанных средой Сабуро с декстрозой, высушенных и стерилизованных в чашке Петри диаметром 55 мм. Использование планшетов исключает необходимость трудоёмкого приготовления питательной среды и автоклавирования. Перед применением питательные планшеты повторно смачивают стерильной дистиллированной водой.

Питательные планшеты позволяют одновременно исследовать большие объёмы проб. Интерпретацию выполняют качественно — по наличию или отсутствию роста, и количественно — подсчётом числа колоний на поверхности мембранного фильтра с последующим расчётом содержания микроорганизмов в КОЕ/мл.

Среда M-E. coli применяется для выявления и дифференциации Escherichia coli и колиформных бактерий в пробах воды мембранно-фильтрационным методом. Принцип основан на применении триптон-жёлчного агара, используемого для выявления Escherichia coli в пищевых продуктах (1), при котором восстановление Escherichia coli происходит быстрее, надёжнее и точнее.

Пробу воды фильтруют через мембрану, после чего мембрану помещают на планшет, насыщенный бульоном M-E. coli, и инкубируют в герметично закрытой чашке Петри при 37 °C. Среда содержит хромогенную смесь, предназначенную для выявления активности глюкуронидазы Escherichia coli (3). Этот фермент обеспечивает дифференциацию Escherichia coli от других колиформных бактерий.

Клетки Escherichia coli расщепляют хромогенную смесь с помощью глюкуронидазы, в результате чего колонии приобретают сине-фиолетовую окраску. Колиформные бактерии, отличные от Escherichia coli, окрашиваются в красный цвет вследствие восстановления ТТХ — хлорида 2,3,5-трифенилтетразолия (2,3,5-triphenyl tetrazolium chloride). Различие окраски позволяет интерпретировать результаты без дополнительного подтверждения. Триптон обеспечивает микроорганизмы необходимыми питательными веществами для роста. Желчные соли подавляют рост грамположительных микроорганизмов.

Методика проведения анализа

1. Отфильтруйте исследуемую пробу через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.
2. Регидратируйте питательный планшет, добавив 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на регидратированный питательный планшет.
5. Инкубируйте засеянный питательный планшет. Для среды M-E. coli инкубацию проводят при 37 °C в герметично закрытой чашке Петри.
6. Выполните качественную интерпретацию по наличию или отсутствию роста.
7. Для количественной оценки подсчитайте число колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитайте содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.

Тип исследуемой пробы

• Исследуемый материал: пробы воды.

Отбор и обращение с пробами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб в соответствии с установленными руководствами и местными стандартами (2).

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте маркировку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы при обращении с пробами и культурами.
• При работе с пробами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Бета-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы E. coli могут быть бета-глюкуронидаза-отрицательными.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост вследствие различий в пищевых потребностях.

Технические характеристики

• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: сухие питательные планшеты
• Количество: 20 планшетов
• Диаметр абсорбирующего планшета: 50 мм
• Диаметр чашки Петри: 55 мм
• Стерильность: стерильная готовая к применению культуральная среда
• Метод анализа: мембранная фильтрация
• Размер пор мембранного фильтра: 0,22 или 0,45 мкм
• Объём стерильной дистиллированной или очищенной воды для регидратации: 2,0–2,5 мл
• Температура инкубации: 37 °C
• Среда для восстановления: бульон M-E. coli
• Дифференцирующий признак Escherichia coli: активность глюкуронидазы, вызывающая сине-фиолетовую окраску колоний
• Дифференцирующий признак других колиформных бактерий: восстановление ТТХ с образованием красной окраски колоний
• Ингибирующий компонент: желчные соли, подавляющие рост грамположительных микроорганизмов

Контроль качества

Внешний вид и цвет

• Внешний вид: сухой мембранный фильтрующий планшет диаметром 50 мм
• Цвет: питательный планшет от бледного до жёлтого
• Испытание на стерильность: соответствует критериям выпуска

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продлевают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ожидаемые рабочие характеристики

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при применении в соответствии с указаниями на этикетке, в пределах срока годности и при хранении при рекомендованной температуре.

Хранение и срок годности

• Условия хранения при получении: 2–8 °C.
• Срок использования: до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условие сохранения рабочих характеристик: применение в течение установленного срока годности.

Утилизация

Пользователь обязан обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с пробой, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками (4, 5).