HiMedia MF026F-50PT Колиформная среда со стерильной целлюлозно-нитратной мембраной (50 планшетов)

Готовая питательная среда HiMedia MF026F-50PT Колиформная среда со стерильной целлюлозно-нитратной мембраной (50 планшетов) для обнаружения и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli методом хромогенной дифференциации. Среда предназначена для анализа проб после мембранной фильтрации через стерильный фильтр с размером пор 0,22 или 0,45 мкм; результаты оценивают по наличию роста и количеству колониеобразующих единиц (КОЕ)/мл.

Назначение

Среда предназначена для обнаружения и количественного определения общих колиформных бактерий и Escherichia coli методом хромогенной дифференциации.

Принцип действия и интерпретация результатов

Готовая стерильная питательная среда представляет собой биологически инертную абсорбирующую подушечку диаметром 50 мм, пропитанную стандартной питательной средой, высушенную и стерилизованную в чашке Петри диаметром 55 мм. Для подготовки к анализу питательную подушечку повторно смачивают стерильной дистиллированной или очищенной водой.

Хромогенная смесь и лаурилсульфат натрия (SLS) обеспечивают дифференциацию колиформных бактерий и подавление сопутствующей грамположительной микрофлоры. Лаурилсульфат натрия ингибирует грамположительные микроорганизмы.

Фермент β-D-галактозидаза, вырабатываемый колиформными бактериями, расщепляет один из хромогенов, в результате чего колонии колиформных бактерий приобретают фиолетовую окраску. Фермент β-D-глюкуронидаза, вырабатываемый Escherichia coli, расщепляет другой хромоген — X-глюкуронид. В результате расщепления обоих хромогенов колонии Escherichia coli окрашиваются в синий цвет.

Добавление L-триптофана усиливает индольную реакцию и повышает надёжность обнаружения Escherichia coli в сочетании с двумя хромогенами.

Для подтверждения Escherichia coli на тёмно-синюю или фиолетовую колонию наносят каплю реактива Ковача. Образование вишнёво-красной окраски указывает на положительную реакцию.

Методика проведения анализа

1. Профильтруйте исследуемую пробу через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.
2. Стерильной дистиллированной или очищенной водой регидратируйте питательную подушечку, добавив 2,0–2,5 мл воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на регидратированную питательную подушечку.
5. Инкубируйте засеянную питательную среду.
6. Проведите качественную интерпретацию результатов по наличию или отсутствию роста.
7. Проведите количественную интерпретацию результатов подсчётом числа колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитайте количество КОЕ/мл.

Подушечки позволяют исследовать большие объёмы проб за один анализ по сравнению с традиционной подготовкой питательной среды. Подготовка среды и автоклавирование не требуются.

Контроль качества

• Внешний вид: сухая подушечка мембранного фильтра диаметром 50 мм.
• Цвет: питательная подушечка от бледно окрашенной до бесцветной.
• Культуральная реакция: культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продолжают до 48 ч.
• Испытание на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости — 48 ч:

Технические характеристики

• Тип изделия: готовая питательная среда.
• Форма: сухая питательная подушечка на мембранном фильтре в чашке Петри.
• Назначение: обнаружение и количественное определение общих колиформных бактерий и Escherichia coli.
• Метод дифференциации: хромогенный.
• Диаметр биологически инертной абсорбирующей подушечки: 50 мм.
• Диаметр чашки Петри: 55 мм.
• Мембранный фильтр: стерильный, целлюлозно-нитратный.
• Размер пор мембранного фильтра: 0,22 или 0,45 мкм.
• Объём стерильной дистиллированной или очищенной воды для регидратации: 2,0–2,5 мл.
• Хромогенная добавка: имеется.
• Лаурилсульфат натрия (SLS): имеется; ингибирует грамположительные микроорганизмы.
• Дополнительный компонент: L-триптофан.
• Реактив для подтверждения Escherichia coli: реактив Ковача.
• Условия хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Условия при получении: 2–8 °C.
• Количество: 50 планшетов.

Область применения

Среда применяется для микробиологического контроля воды и других фильтруемых проб, когда требуется обнаружение общих колиформных бактерий, идентификация Escherichia coli по окраске колоний и количественная оценка микробной нагрузки в КОЕ/мл.