HiMedia MF022-50PT Среда Сланетца и Бартли (без мембранного фильтра) (50 планшетов)

Питательная микробиологическая среда HiMedia MF022-50PT Среда Сланетца и Бартли (без мембранного фильтра) (50 планшетов) — стерильная готовая к применению среда в форме сухих питательных подложек. Применяется для обнаружения и количественного определения фекальных стрептококков в пробах воды с последующим подсчётом колониеобразующих единиц, при этом видовую идентификацию подтверждают дополнительными биохимическими тестами.

Назначение и область применения

Среда HiMedia MF022-50PT предназначена для обнаружения и количественного определения фекальных стрептококков, включая энтерококки, методом мембранной фильтрации.

Тип образца: пробы воды.

Среда также может применяться как среда для прямого посева. Для пищевых образцов предусмотрена гомогенизация с последующим разведением физиологическим раствором до получения 15–150 колоний на чашке Петри.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда для питательных мембранных подложек DriFilter представляет собой готовую к применению стерильную культуральную среду в виде биологически инертных абсорбирующих подложек диаметром 50 мм, пропитанных средой Сабуро с декстрозой, высушенных и стерилизованных в чашке Петри диаметром 55 мм.

Питательные подложки смачивают стерильной дистиллированной или очищенной водой и используют без приготовления питательной среды и автоклавирования. Применение питательных подложек позволяет одновременно исследовать больший объём образца. Результат оценивают качественно по наличию или отсутствию роста и количественно по числу колоний на поверхности мембранного фильтра с расчётом содержания микроорганизмов в КОЕ/мл.

Среда Сланетца и Бартли первоначально разработана Slanetz и Bartley для обнаружения и количественного определения энтерококков методом мембранной фильтрации. Среда может использоваться также для прямого посева. Среда M6121 отличается от M612 типом применяемой буферной системы. Состав среды соответствует требованиям ISO.

Триптоза и дрожжевой экстракт служат источниками необходимых питательных веществ, витаминов группы B и азотистых соединений. Среда обладает высокой селективностью в отношении энтерококков. Азид натрия ингибирует грамотрицательные микроорганизмы.

Трифенилтетразолий хлорид (TTC) восстанавливается внутри бактериальной клетки до нерастворимого формазана, в результате чего образуются колонии тёмно-красного цвета. При инкубации среды при повышенной температуре 44–45 °C все красные или бордовые колонии можно считать предположительно колониями энтерококков. Не все виды микроорганизмов восстанавливают TTC, поэтому следует учитывать также бледные колонии.

Для исследования водных проб воду фильтруют через мембранный фильтр, который затем помещают на поверхность среды Сланетца и Бартли. Мембрану инкубируют при 35 °C в течение 4 ч, затем при 44–45 °C в течение 44–48 ч. Красные или бордовые колонии считают колониями энтерококков. Предварительная инкубация при 35 °C способствует восстановлению повреждённых микроорганизмов.

Для пищевых образцов гомогенаты или их разведения распределяют по поверхности агара и инкубируют при 35 °C в течение 48 ч. Подсчитывают розовые или тёмно-красные колонии с узкой беловатой каймой.

Методика проведения анализа

1. Отфильтруйте исследуемую пробу через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 мкм или 0,45 мкм.
2. Регидратируйте питательную подложку, добавив 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на регидратированную питательную подложку.
5. Инкубируйте засеянную питательную подложку в соответствии с выбранным режимом.
6. Для качественной интерпретации оцените наличие или отсутствие роста.
7. Для количественной интерпретации подсчитайте число колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитайте содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.

Режимы инкубации

Пробы воды

1. Фильтрация воды через мембранный фильтр.
2. Инкубация мембранного фильтра на поверхности среды при 35 °C в течение 4 ч.
3. Последующая инкубация при 44–45 °C в течение 44–48 ч.
4. Подсчёт красных и бордовых колоний как предположительно принадлежащих энтерококкам.
5. Бледные колонии также учитывают, поскольку не все виды микроорганизмов восстанавливают TTC.

Пищевые образцы

1. Гомогенизируйте образец.
2. Разведите гомогенат физиологическим раствором до получения 15–150 колоний на чашке Петри.
3. Нанесите гомогенат или его разведение на поверхность агара.
4. Инкубируйте при 35 °C в течение 48 ч.
5. Подсчитайте розовые или тёмно-красные колонии с узкой беловатой каймой.

Технические характеристики

• Тип изделия: питательная среда
• Назначение: обнаружение и количественное определение фекальных стрептококков и энтерококков
• Тип образца: вода
• Метод анализа: мембранная фильтрация; допускается прямой посев
• Размер пор мембранного фильтра: 0,22 мкм или 0,45 мкм
• Объём стерильной воды для регидратации: 2,0–2,5 мл
• Форма среды: сухая абсорбирующая питательная подложка
• Диаметр подложки: 50 мм
• Диаметр чашки Петри: 55 мм
• Стерильность: стерильная готовая к применению среда
• Селективность: высокая селективность в отношении энтерококков
• Дифференцирующий компонент: трифенилтетразолий хлорид (TTC)
• Основные питательные компоненты: триптоза, дрожжевой экстракт
• Ингибирующий компонент: азид натрия
• Условия хранения после получения: 10–30 °C
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке

Контроль качества

Внешний вид

Сухая мембранная фильтрующая подложка диаметром 50 мм.

Цвет

Питательная подложка светло-жёлтого цвета.

Испытание на стерильность

Соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 44–45 °C в течение 44–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Сбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с руководствами и местными стандартами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

Для видовой идентификации требуется проведение дополнительных биохимических исследований.

Условия эксплуатации и оценка характеристик

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании в соответствии с инструкцией на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованном температурном диапазоне.

Оптимальные характеристики продукта обеспечиваются при использовании в течение указанного на этикетке срока годности.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики при обращении с образцами и культурами