Универсальная хромогенная среда для мембранной технологии HiMedia MF018F

Хромогенная питательная среда Универсальная хромогенная среда для мембранной технологии HiMedia MF018F предназначена для выделения и подсчёта бактерий методом хромогенной дифференциации. Универсальная хромогенная среда HiMedia MF018F применяется для анализа воды, сточных вод, фармацевтических препаратов, косметики, упаковочных материалов и других клинических и неклинических образцов с инкубацией при 35–37 °C в течение 18–48 ч.

Назначение и область применения

Среда используется для качественного выявления роста микроорганизмов и количественного определения микробной нагрузки по числу колониеобразующих единиц на поверхности мембранного фильтра с расчётом КОЕ/мл.

Исследуемые материалы:

• вода;
• сточные воды;
• фармацевтические препараты;
• косметические средства;
• упаковочные материалы;
• другие клинические и неклинические образцы.

Универсальная хромогенная дифференциальная среда рекомендована для предварительной идентификации микроорганизмов в клинических и неклинических образцах, а также может применяться как универсальный питательный агар для выделения различных микроорганизмов.

Принцип действия и интерпретация результатов

Питательная среда основана на хромогенной дифференциации микроорганизмов по цвету образующихся колоний. Различия в окраске обусловлены реакциями родо- или видоспецифичных ферментов с двумя хромогенными субстратами, включёнными в состав среды.

• Виды рода Enterococcus, Escherichia coli и колиформные бактерии образуют ферменты, специфически расщепляющие хромогенные субстраты и формирующие характерную окраску колоний.
• Пептоны служат источниками аминокислот, включая фенилаланин и триптофан, способствующих выявлению активности триптофан-дезаминазы. Это облегчает идентификацию микроорганизмов родов Proteus, Morganella и Providencia.
• Один из хромогенных субстратов расщепляется ферментом β-глюкозидазой, присутствующим у энтерококков, что приводит к образованию голубовато-зелёных колоний.
• Escherichia coli содержит фермент β-галактозидазу, который специфически расщепляет второй хромогенный субстрат с образованием колоний фиолетового цвета.
• Escherichia coli можно дифференцировать и подтвердить среди других колоний аналогичной окраски с помощью индольного теста.
• Колиформные бактерии расщепляют оба хромогенных субстрата, формируя колонии от синего до фиолетового цвета.
• Колонии микроорганизмов родов Proteus, Morganella и Providencia приобретают светло-коричневую или коричневую окраску вследствие активности триптофан-дезаминазы.
• Пептический перевар животной ткани и ферментативный гидролизат казеина обеспечивают азотистые и углеродистые соединения, необходимые питательные вещества для роста, а также служат источниками аминокислот.

Среда DriFilter представляет собой готовую к применению стерильную культуральную среду в виде биологически инертных абсорбирующих питательных подложек диаметром 50 мм, пропитанных универсальной хромогенной дифференциальной средой HiChrome, высушенных и стерилизованных в чашке Петри диаметром 55 мм. Формат питательных подложек исключает необходимость трудоёмкого приготовления среды и автоклавирования: подложку требуется только повторно увлажнить стерильной дистиллированной водой. Применение питательных подложек позволяет одновременно исследовать большие объёмы проб.

По сравнению с приготовлением культуральной среды в лаборатории готовые стерильные подложки не требуют приготовления питательной основы и процедур автоклавирования.

Методика проведения анализа

1. Исследуемую пробу профильтруйте через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,22 или 0,45 мкм.
2. Увлажните питательную подложку, добавив 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на увлажнённую питательную подложку.
5. Инкубируйте засеянную питательную подложку. Для общего применения условия культивирования составляют 35–37 °C в течение 18–48 ч.
6. Проведите качественную интерпретацию по наличию или отсутствию роста.
7. Проведите количественную интерпретацию подсчётом числа колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитайте содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.

Состав

Состав среды скорректирован и стандартизован для обеспечения установленных эксплуатационных характеристик.

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид: сухая фильтровальная питательная подложка диаметром 50 мм.
• Цвет: подложка светло-жёлтого цвета.
• Тест на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Технические характеристики

• Тип изделия: питательная среда.
• Форма: стерильная сухая питательная подложка для мембранной фильтрации.
• Диаметр питательной подложки: 50 мм.
• Диаметр чашки Петри: 55 мм.
• Размер пор мембранного фильтра: 0,22 или 0,45 мкм.
• Объём стерильной дистиллированной или очищенной воды для увлажнения: 2,0–2,5 мл.
• Диапазон температуры культивирования: 35–37 °C.
• Время культивирования по назначению: 18–48 ч.
• Время инкубации при контроле культуральных характеристик: 18–24 ч.
• Конечный pH при 25 °C: 5,4 ± 0,2.
• Метод выявления: хромогенная дифференциация по цвету колоний.
• Количественный показатель: число колониеобразующих единиц, КОЕ/мл.
• Условия хранения: 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.