Среда с типолем HiMedia MF015F

Питательная среда «Среда с типолем HiMedia MF015F» производства HiMedia предназначена для подсчёта кишечных лактозоположительных бактерий методом мембранной фильтрации. Среда применяется для анализа воды, пищевых продуктов и сточных вод; исследуемый образец фильтруют через стерильную мембрану с размером пор 0,45 мкм, а культивирование проводят при 44 °C в течение 18–48 ч.

Назначение и область применения

Среда используется для качественного выявления и количественного подсчёта кишечных бактерий в следующих материалах:

• вода;
• пищевые продукты;
• сточные воды.

Подсчёт колиформных бактерий и Escherichia coli проводят на отдельных объёмах воды. Образовавшиеся жёлтые колонии подвергают дальнейшей идентификации.

Состав

Состав скорректирован и стандартизирован в соответствии с параметрами эффективности.

Принцип действия и интерпретация результатов

Питательная среда для мембранных фильтров представляет собой готовую к применению стерильную культуральную среду в виде биологически инертных абсорбирующих подложек диаметром 50 мм, пропитанных средой с типолем, высушенных и стерилизованных в чашке Петри диаметром 55 мм.

Перед использованием подложку повторно смачивают стерильной дистиллированной или очищенной водой. Приготовление питательной среды и автоклавирование не требуются.

Применение питательных подложек позволяет одновременно исследовать большие объёмы образца. Результаты оценивают:

• качественно — по наличию или отсутствию роста;
• количественно — по числу колоний на поверхности мембранного фильтра с расчётом микробной обсеменённости в КОЕ/мл.

Использование типоля вместо желчных солей ранее рекомендовалось для определения колиформных бактерий. При проведении предварительной инкубации при более низкой температуре этап ресусцитации не требуется. Для микроорганизмов, не подвергавшихся хлорированию, рекомендуется инкубация в течение 4 ч при 30 °C; для хлорированных микроорганизмов требуется инкубация в течение 6 ч при 25 °C.

Методика проведения анализа

1. Профильтруйте исследуемую пробу через стерильный мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм.
2. Регидратируйте питательную подложку, добавив 2,0–2,5 мл стерильной дистиллированной или очищенной воды.
3. После фильтрации асептически извлеките мембранный фильтр стерильным пинцетом.
4. Поместите мембранный фильтр на регидратированную питательную подложку.
5. Инкубируйте засеянную питательную подложку.
6. Проведите качественную интерпретацию результатов по наличию или отсутствию роста.
7. Для количественной оценки подсчитайте число колоний на поверхности мембранного фильтра и рассчитайте содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.

Идентификация предполагаемых микроорганизмов

Предполагаемые колиформные бактерии

Жёлтые колонии с мембран, инкубированных при 35 °C, после пересевания в лактозно-пептонную воду образуют газ при 35 °C через 43 ч.

Предполагаемые Escherichia coli

Жёлтые колонии с мембраны, инкубированной при 44 °C, после пересевания в лаурил-триптозо-маннитольный бульон и инкубации при 44 °C образуют газ и индол через 24 ч.

Условия культивирования

• Температура культивирования для подсчёта кишечных лактозоположительных бактерий: 44 °C.
• Продолжительность культивирования: 18–48 ч.
• Температура предварительной инкубации для микроорганизмов, не подвергавшихся хлорированию: 30 °C.
• Продолжительность предварительной инкубации для микроорганизмов, не подвергавшихся хлорированию: 4 ч.
• Температура предварительной инкубации для хлорированных микроорганизмов: 25 °C.
• Продолжительность предварительной инкубации для хлорированных микроорганизмов: 6 ч.
• Условия наблюдения культуральных характеристик: 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Контроль качества

• Внешний вид: сухая мембранная фильтрующая подложка диаметром 50 мм.
• Цвет: светлоокрашенная питательная подложка.
• Испытание на стерильность: соответствует критериям выпуска.

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Срок применения: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

Технические характеристики

• Тип изделия: питательная культуральная среда.
• Форма выпуска: стерильные абсорбирующие питательные подложки.
• Диаметр питательной подложки: 50 мм.
• Диаметр чашки Петри: 55 мм.
• Размер пор мембранного фильтра: 0,45 мкм.
• Объём стерильной дистиллированной или очищенной воды для регидратации: 2,0–2,5 мл.
• Метод анализа: мембранная фильтрация с последующим культивированием.
• Результат качественного анализа: наличие или отсутствие роста.
• Результат количественного анализа: число колоний и содержание микроорганизмов в КОЕ/мл.
• Назначение: подсчёт кишечных лактозоположительных бактерий.
• Производитель: HiMedia.