HiMedia MCD813-500G Буферная HiCynth среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем

Буферная HiCynth среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем HiMedia MCD813-500G. Рекомендуется для селективного выделения и культивирования видов Legionella из проб воды из градирен и других образцов.

Принцип измерения

Среда основана на модификации Эдельштейна (Edelstein), которая, в свою очередь, развилась из агара с активированным углем и дрожжевым экстрактом (CYE), разработанного Feeley et al. В состав введен буфер ACES для улучшения рабочих характеристик и α-кетоглутарат для повышения чувствительности среды.

Версия HiCynth™ заменяет пептоны животного и растительного происхождения химически определенными пептонами, что исключает риски возникновения БЭВИ/ТСЭ (BSE/TSE).

Виды Legionella представляют собой узкие грамотрицательные палочки, не образующие спор. Они не окисляют и не ферментируют углеводы в обычных средах и не растут на агаре с кровью овцы. Основным источником энергии для них являются аминокислоты, при этом L-цистин является абсолютным требованием для метаболизма и роста. Активированный уголь в составе среды выполняет функцию детоксиканта. Буфер ACES поддерживает оптимальный pH, а L-цистин гидрохлорид, пирофосфат железа и α-кетоглутарат стимулируют рост бактерий. Для подавления сопутствующей микрофлоры используются антибиотические добавки.

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

1. Суспендируйте 20 г порошка в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2,4 г гранул KOH и перемешайте до растворения.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов среды.
4. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈ 0,1 МПа) в течение 15 минут.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте содержимое по одной стерильной регидратированной ампуле следующих добавок:
   • MWY Selective Supplement (FD040);
   • Legi Growth Supplement w/o SS (Twin Pack) (FD041A).
7. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри, обеспечивая равномерное распределение частиц угля.

Для повышения селективности в расплавленную среду по выбору могут быть добавлены:

• VCAT Selective Supplement (FD017);
• C3V Selective Supplement (FD037);
• PGV Selective Supplement (FD038).

Технические характеристики

• Вес: 500 г
• Внешний вид: серый или черный гомогенный свободнотекущий порошок
• Свойства геля: плотный, сопоставим с 1,7 % агаровым гелем
• Цвет и прозрачность готовой среды: серо-черный опалесцирующий гель
• pH (4 % водного раствора при 25 °C): 6,9 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,70–7,10
• Происхождение компонентов: химически определенные (HiCynth™)
• Форма выпуска: порошок
• Тип упаковки: ПНД (HDPE)

Культуральные характеристики

Характеристики определены в атмосфере с влажностью 90 % при добавлении добавок FD041A и FD040 после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 суток.

* Соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Тип образцов

• Пробы воды.

Ограничения

• Для полной идентификации микроорганизмов требуется проведение дополнительных биохимических подтверждающих тестов.
• Индивидуальные организмы могут иметь различные требования к росту и демонстрировать вариативность паттернов роста на данной среде.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 10–30 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть для предотвращения образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Меры предосторожности и утилизация

• Только для профессионального использования.
• При работе с культурами Legionella обязательно использование халата, маски, перчаток и работа в вытяжном шкафу (safety hood).
• Загрязненные материалы и использованные среды должны быть стерилизованы в автоклаве или подвергнуты инсинерации перед утилизацией в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.