HiMedia MCD813-100G Буферная HiCynth среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем

Порошкообразная питательная среда HiMedia MCD813-100G Буферная HiCynth среда с дрожжевым экстрактом и активированным углем с конечным pH 6,9±0,2. Среда предназначена для селективного выделения и культивирования видов Legionella из проб воды, включая образцы из градирен, с ограниченным ростом посторонней микрофлоры.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения и культивирования видов Legionella из проб воды, включая воду из градирен и другие образцы.

Тип образца

• Тип образца: пробы воды

Состав

Формула рассчитана и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. HiCynth™ Peptone No.5 — химически определённый пептон.

Принцип действия и интерпретация

Агар с углём и дрожжевым экстрактом (CYE) первоначально был разработан как модификация среды F-G. В состав среды F-G входили крахмал и ферментативный гидролизат казеина. Эти компоненты были заменены соответственно углём и дрожжевым экстрактом, что улучшило восстановление Legionella pneumophilla. Позднее было установлено, что добавление буфера ACES к агару с углём и дрожжевым экстрактом улучшает рабочие характеристики среды. Дополнительная модификация с введением α-кетоглутарата повысила чувствительность среды.

Буферная основа агара с углём и дрожжевым экстрактом разработана на основе этой модификации. Буферная основа агара с углём, дрожжевым экстрактом и HiCynth™ получена заменой пептонов животного и растительного происхождения на химически определённые пептоны, что исключает риски BSE/TSE, связанные с применением пептонов животного происхождения.

Виды Legionella представляют собой не образующие спор узкие грамотрицательные палочки. Legionella вызывает пневмонию — болезнь легионеров — или лихорадочное заболевание, известное как лихорадка Понтиака. В стандартных питательных средах виды Legionella не окисляют и не ферментируют углеводы и не растут на кровяном агаре с бараньей кровью. На буферном агаре с углём и дрожжевым экстрактом рост происходит лучше и быстрее.

Аминокислоты являются основными источниками энергии для Legionella. L-цистин необходим для роста и играет важную роль в метаболизме Legionella. L-цистин и пирофосфат железа поддерживают рост Legionella. Уголь действует как детоксицирующий компонент. Пептон HiCynth™ No.5 служит источником витаминов, азота и углерода. Буфер ACES поддерживает оптимальный для роста pH. Гидрохлорид L-цистина, пирофосфат железа и α-кетоглутарат стимулируют рост видов Legionella.

Для селективного выделения можно применять антибиотические добавки, подавляющие рост загрязняющих микроорганизмов:

• селективная добавка C3V (FD037) содержит цефалотин, колистин, ванкомицин и циклогексимид;
• селективная добавка MWY (FD040) содержит глицин, полимиксин B, анизомицин, ванкомицин, бромтимоловый синий и бромкрезоловый пурпурный.

При работе с культурами Legionella необходимо использовать халат, маску и перчатки; работы следует проводить в защитном боксе.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 20 г среды в 500 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Добавьте 2,4 г гранул KOH и перемешайте до растворения.
3. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Охладите среду до 45–50 °C.
6. В асептических условиях добавьте стерильное регидратированное содержимое по одному флакону селективной добавки MWY (FD040) и добавки для роста Legi без SS, двойная упаковка (FD041A).
7. Тщательно перемешайте и при постоянном перемешивании разлейте среду в стерильные чашки Петри. Следите за равномерным распределением частиц активированного угля.
8. Для дополнительной селективности по выбору можно добавить в расплавленную среду селективную добавку VCAT (FD017), C3V (FD037) или PGV (FD038).

Пробоотбор и обращение с образцами

Для проб воды применяйте соответствующие методы отбора и обработки образцов в соответствии с действующими руководствами и местными нормативами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MCD813-100G
• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Материал упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Происхождение пептона: химически определённый пептон HiCynth™
• Конечный pH при 25 °C: 6,9±0,2
• Температурный диапазон хранения: 10–30 °C
• Температура хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок серого или чёрного цвета

Гелеобразование

• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с гелем 1,7 % агара

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Цвет и прозрачность: в чашках Петри образуется опалесцирующий гель серо-чёрного цвета

Реакция

• Условия определения: реакция водного раствора с концентрацией 4,0 % м/о при 25 °C
• pH: 6,9±0,2

Диапазон pH

• Диапазон pH: 6,70–7,10

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют в атмосфере с влажностью 90 % с добавлением добавок FD041A и FD040 после инкубации при 35–37 °C в течение 3–4 суток.

• Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

• Для полной идентификации необходимо провести дополнительное биохимическое подтверждение.
• Разные микроорганизмы имеют индивидуальные требования к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на среде.

Условия хранения и срок годности

Храните продукт при температуре