Питательная среда HiMedia MCD640-500G HiCynth агар с розовым бенгальским и хлорамфениколом — селективная сухая порошкообразная среда для выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов. Применяется при анализе пищевых, объектов окружающей среды и клинических образцов; чувствительна к воздействию света, поскольку фотодеградация розового бенгальского образует токсичные для грибов соединения.

Назначение и область применения

Среда рекомендована для селективного выделения и количественного определения дрожжей и плесневых грибов из следующих образцов:

• пищевые продукты;
• объекты окружающей среды;
• клинические образцы, включая соскобы кожи.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. HiCynth™ Peptone No.4 представляет собой химически определённый пептон.

Принцип действия и интерпретация результатов

Агар с розовым бенгальским и хлорамфениколом первоначально разработан Jarvis и позднее модифицирован Overcast и Weakley. Применение розового бенгальского в средах с нейтральным pH описано Smith и Dawson.

В среде Rose Bengal Chloramphenicol HiCynth™ животные и растительные пептоны заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (BSE/TSE), характерных для пептонов животного происхождения.

• Пептон HiCynth™ No.4 обеспечивает среду источниками углерода и азота, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами.
• Декстроза (глюкоза) является сбраживаемым углеводом.
• Хлорамфеникол оказывает ингибирующее действие на грамотрицательные бактерии.
• Краситель розовый бенгал подавляет развитие бактерий и уменьшает расползание плесневых грибов.
• Розовый бенгал контролирует размер и высоту колоний плесневых грибов, включая виды Rhizopus.
• Нейтральный pH среды в сочетании с антибиотиком является технологически значимым фактором селективности.
• Розовый бенгал поглощается колониями плесневых грибов и дрожжей, что облегчает их количественный подсчёт.

Количество дрожжей или плесневых грибов в 1 г или 1 мл исследуемого образца рассчитывают умножением числа колоний на коэффициент разведения.

Бактерии и дрожжи могут иметь сходный внешний вид колоний, поэтому при необходимости их следует исследовать микроскопически. Из-за селективных свойств среды и типа культивируемого образца отдельные штаммы грибов могут плохо расти или не расти на готовой среде. Некоторые штаммы бактерий также могут не подавляться либо подавляться только частично.

Среду необходимо защищать от света: фотодеградация розового бенгальского приводит к образованию соединений, токсичных для грибов.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 32,15 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,10 МПа) при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Работа с образцами

Для клинических образцов применяйте соответствующие методы обращения с образцами в соответствии с установленными лабораторными руководствами.

Для пищевых образцов используйте соответствующие методы отбора и подготовки проб в соответствии с действующими руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Среда предназначена для лабораторной диагностики вне организма.
• Перед открытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При работе с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Информацию по безопасности при необходимости следует уточнять в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среду нельзя подвергать воздействию света, поскольку фотодеградация розового бенгальского образует соединения, токсичные для грибов.

Контроль качества

Внешний вид

Светло-жёлтый или розовый однородный сыпучий порошок.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с гелем из 1,55 % агара.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель насыщенного розового цвета.

Реакция среды

Реакция водного раствора с массовой концентрацией 3,22 % при 25 °C.

• pH: 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

pH: 7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 25–30 °C в течение 5 суток.

Ранее обозначался как Aspergillus niger.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения сухой и приготовленной среды: 15–25 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытом контейнере.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом состоянии, плотно закрывая флакон для предотвращения образования комков из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики среды сохраняются при использовании в течение указанного срока годности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать в соответствии с действующими лабораторными методами.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MCD640-500G
• Тип продукта: HiCynth