HiMedia MCD1991I-500G HiCrome Хромогенный колиформный HiCynth агар

Хромогенный колиформный агар HiMedia MCD1991I-500G HiCrome HiCynth для одновременного обнаружения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды. Среда разработана на основе химически определимых пептонов HiCynth™ для исключения рисков BSE/TSE, связанных с использованием компонентов животного происхождения.

Принцип измерения и интерпретация

Среда HiCrome® Chromogenic Coliform Agar является селективной и содержит три хромогенных субстрата для дифференциации микроорганизмов:

1. Общие колиформы: фермент $\beta$-D-галактозидаза расщепляет 6-хлоро-3-индокси-$\beta$-D-галактопиранозид, в результате чего образуются колонии от розового до красного цвета.
2. Escherichia coli: фермент $\beta$-D-глюкуронидаза расщепляет 5-бром-4-хлоро-3-индокси-$\beta$-D-глукуроновую кислоту. Колонии E. coli приобретают темно-синий или фиолетовый цвет за счет расщепления обоих хромогенов.
3. Усиление реакции: присутствие третьего хромогена IPTG (изопропил-$\beta$-D-тиогалактопиранозид) усиливает интенсивность окрашивания.

Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надежность идентификации.

Роль компонентов:

• Химически определенные пептоны HiCynth™ № 2 и № 5 обеспечивают азот- и углеродсодержащие соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и питательные вещества.
• Пируват натрия и сорбитол служат источниками ферментируемых углеводов и питательных веществ, способствуя восстановлению и быстрому росту даже сублетально поврежденных колиформ.
• Фосфаты поддерживают pH среды.
• Tergitol-7 подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Подготовка среды

1. Суспендируйте 30,92 г сухой среды в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Важно: не автоклавировать и не перегревать среду.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Посев и идентификация

Инокуляцию образца проводят одним из следующих методов:

• Метод посева в глубокий слой агара (pour plate).
• Метод посева на поверхность среды (spreading).
• Метод мембранной фильтрации.

Подтверждение E. coli: Для подтверждения наличия E. coli на темно-синие или фиолетовые колонии наносят каплю реактива Ковача. Появление вишнево-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

• Вес: 500 г
• Внешний вид: однородный свободно текучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый опалесцирующий гель.
• Диапазон pH: 6,60–7,00.

Контроль качества (Культуральные характеристики)

Характеристики наблюдаются после инкубации при 34–38 °C в течение 24 часов.

* Цвет определяется либо на чашке, либо на мембране.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.