HiMedia MCD1991I-100G HiCrome Хромогенный колиформный HiCynth агар

Хромогенный колиформный агар HiMedia MCD1991I-100G HiCrome HiCynth для одновременного обнаружения Escherichia coli и общих колиформ в пробах воды. Среда основана на использовании химически определимых пептонов HiCynth™, что исключает риски BSE/TSE, связанные с компонентами животного происхождения.

Принцип измерения и интерпретация

HiCrome® Chromogenic Coliform Agar является селективной средой, содержащей три хромогенных субстрата для дифференциации микроорганизмов:

1. Общие колиформы: вырабатывают фермент $\beta$-D-галактозидазу, который расщепляет 6-хлоро-3-индокси-$\beta$-D-галактопиранозид, в результате чего образуются колонии от розового до красного цвета.
2. Escherichia coli: вырабатывает фермент $\beta$-D-глюкуронидазу, который расщепляет 5-бромо-4-хлоро-3-индокси-$\beta$-D-глюкуроновую кислоту. Благодаря расщеплению обоих хромогенов колонии E. coli приобретают темно-синий или фиолетовый цвет.
3. Усиление реакции: присутствие третьего хромогена IPTG (изопропил-$\beta$-D-тиогалактопиранозид) усиливает интенсивность окрашивания.

Добавление L-триптофана улучшает индольную реакцию, что повышает надежность идентификации.

Роль компонентов:

• HiCynth™ Peptone No. 2 и No. 5: обеспечивают азотистые и углеродные соединения, длинноцепочечные аминокислоты, витамины и питательные вещества.
• Пируват натрия и сорбитол: служат источниками питательных веществ и ферментируемых углеводов, способствуя восстановлению и быстрому росту даже сублетально поврежденных колиформ.
• Фосфаты: поддерживают pH среды.
• Tergitol-7: подавляет рост грамположительных и некоторых грамотрицательных бактерий, не относящихся к колиформам.

Методика проведения анализа

Приготовление среды

1. Растворите 30,92 г сухого остатка (эквивалентный вес среды на 1 литр) в 1000 мл дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Внимание: не подвергайте среду автоклавированию и не перегревайте.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Посев и подтверждение

Инокуляция может быть выполнена следующими методами:

• Метод глубокого посева (pour plate).
• Поверхностный посев образца на слой среды.
• Метод мембранной фильтрации.

Подтверждение E. coli: на темно-синие или фиолетовые колонии нанесите каплю реагента Ковакса. Появление вишнево-красного окрашивания свидетельствует о положительной реакции.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Дополнительные параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободно текущий порошок от кремового до желтого цвета.
• Желирование: плотный гель, сопоставимый с 1,5% агаром.
• Цвет и прозрачность готовой среды: светло-желтый опалесцирующий гель.
• pH: 6,60–7,00.

Культуральные характеристики

Характеристики определены после инкубации при 34–38 °C в течение 24 часов.

* Цвет определяется как на поверхности среды, так и на мембране.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение сухого порошка: в плотно закрытом контейнере.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Температура при получении: 15–25 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке.