HiMedia MCD1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости

Сухая питательная среда HiMedia MCD1540A-500G HiCrome агар для листерий Оттавиани-Агости предназначена для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes. Среда применяется для анализа пищевых продуктов, кормов и образцов производственной среды; приготовленную среду хранят при 2–8 °C, а сухой препарат — при 15–25 °C.

Назначение

Среда рекомендована для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из:

• пищевых продуктов;
• кормов для животных;
• образцов окружающей среды в зонах производства и обращения пищевой продукции.

Формула основана на рецептуре Оттавиани и Агости для селективного и дифференциального выделения Listeria monocytogenes из пищевых продуктов и кормов. Рецептура принята комитетом ISO и соответствует методическому подходу ISO 11290-1:2017 для обнаружения Listeria monocytogenes и других видов Listeria.

Состав

Состав, г/л:

* Химически определённые пептоны.
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Процедура приготовления

1. Взвесьте 36,02 г порошка и суспендируйте в 460 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов на квадратный дюйм (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте стерильное содержимое одного флакона добавки для обогащения LP Supplement 1 (FD214) и стерильное восстановленное содержимое селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A).
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Пептоны HiCynth™ № 1 и HiCynth™ № 5 полностью заменяют пептоны животного или растительного происхождения. Они обеспечивают среду азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и необходимыми питательными веществами для роста. Использование химически определённых пептонов позволяет избежать рисков, связанных с губчатой энцефалопатией крупного рогатого скота (BSE) и трансмиссивными губчатыми энцефалопатиями (TSE), характерных для пептонов животного происхождения.

• Пируват натрия поддерживает активный рост микроорганизмов.
• Глюкоза является ферментируемым углеводом.
• Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.
• Фосфатная система буферизует питательную среду.
• Хлорид лития совместно с селективными добавками FD212A подавляет сопутствующую микрофлору и обеспечивает рост видов Listeria.
• Виды Listeria гидролизуют хромогенный субстрат, в результате чего образуются колонии зеленовато-синего цвета.
• Дифференциация Listeria monocytogenes от других видов Listeria основана на активности фосфатидилинозитол-специфичной фосфолипазы C (PIPLC).
• Фермент фосфолипаза C гидролизует очищенный субстрат, содержащийся в добавке FD214, что приводит к образованию непрозрачного ореола вокруг колоний Listeria monocytogenes.

Listeria monocytogenes является грамположительным пищевым патогеном человека и может вызывать тяжёлые инфекции у беременных женщин, включая выкидыш, мертворождение, неонатальный листериоз, менингит или первичную бактериемию у взрослых и детей. Патогенность Listeria ivanovii для человека остаётся неопределённой.

Listeria monocytogenes и Listeria innocua обладают сходными биохимическими свойствами и не могут быть надёжно дифференцированы на традиционных средах PALCAM и Oxford. Поэтому для окончательной дифференциации L. monocytogenes и L. ivanovii необходимо выполнить дополнительные биохимические тесты.

Образцы и обращение с ними

Для пищевых продуктов, кормов и образцов окружающей среды применяйте соответствующие методы отбора и обращения с образцами согласно установленным методическим рекомендациям.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Меры предосторожности

• Перед открытием контейнера прочитайте этикетку.
• Используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При работе с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической практики.
• При обращении с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими рекомендациями.
• Требования безопасности могут быть приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

• Из-за различий в пищевых потребностях отдельные штаммы могут демонстрировать слабый рост на этой среде.
• Для дифференциации L. monocytogenes и L. ivanovii необходимо проведение дополнительных биохимических тестов.

Контроль качества

Внешний вид

Однородный, свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,5%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется опалесцирующий гель светло-янтарного цвета.

Реакция

Реакция 7,2%-ного водного раствора при 25 °C: pH 7,2 ± 0,2.

Диапазон pH

7,00–7,40.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления стерильной добавки для обогащения LP Supplement 1 (FD214) и стерильной селективной добавки OA Selective Supplement (FD212A), после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Технические характеристики