HiMedia MCD1340-500G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом

Питательная микробиологическая среда HiMedia MCD1340-500G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом на основе химически определённых пептонов HiCynth™. Среда предназначена для селективного выделения энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и кормов для животных; сорбитолферментирующие и β-D-глюкуронидазоположительные микроорганизмы образуют окрашенные колонии, а Escherichia coli O157:H7 — бесцветные.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых образцов и кормов для животных.

Тип изделия: питательная микробиологическая среда
Масса: 500 г
Форма: порошок
Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
Тип упаковки: HDPE — полиэтилен высокой плотности
Происхождение пептонов: химически определённые пептоны HiCynth™

Состав

Содержание компонентов указано в граммах на 1 л среды.

* Пептоны с химически определённым составом.
Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных характеристик работы среды.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда МакКонки с сорбитолом основана на составе, описанном Rappaport и Henig. В рецептуре лактоза заменена сорбитолом, поэтому среда предназначена для выявления энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбитол. Такие штаммы образуют бесцветные колонии.

Сорбитолферментирующие штаммы Escherichia coli образуют розово-красные колонии. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из сорбитола, поглощением нейтрального красного и последующим изменением цвета красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Escherichia coli O157:H7 признана причиной геморрагического колита. Для среды МакКонки с сорбитолом сообщались чувствительность 100 % и специфичность 85 % при выявлении Escherichia coli O157:H7; среда рекомендована как средство скрининга этого микроорганизма.

Индикатор B.C. добавлен для выявления фермента β-D-глюкуронидазы, специфичного для Escherichia coli. Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбитол и обладающие β-D-глюкуронидазой, образуют на среде колонии сине-фиолетового цвета. Энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбитол, поэтому формируют бесцветные колонии.

В среде HiCrome® агар МакКонки с сорбитолом HiCynth™ животные и растительные пептоны полностью заменены химически определёнными пептонами для исключения рисков, связанных с пептонами животного происхождения, включая BSE/TSE.

Пептоны HiCynth™ № 4 и HiCynth™ № 5 обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Большинство грамположительных микроорганизмов подавляется кристаллическим фиолетовым и синтетическим моющим веществом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Добавление селективной добавки TC делает среду селективной. Теллурит калия селективно воздействует на серогруппы и подавляет виды Aeromonas и Providencia. Цефиксим подавляет виды Proteus. При наличии Pseudomonas образуются бесцветные колонии.

Для подтверждения можно выполнить оксидазный тест с подозрительными колониями; результат следует учитывать через 5–10 с.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 psi, что соответствует примерно 0,10 МПа, при 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. При необходимости асептически добавьте восстановленное содержимое одного флакона селективной добавки TC (FD147) в 495 мл стерильной расплавленной и охлаждённой среды перед разливом в стерильные чашки Петри.

Тип образца

Тип образца: пищевые продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель пурпурно-красного цвета.

Реакция

Реакция: реакция 5,01%-ного водного раствора по массе при 25 °C.
pH: 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости — в течение 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E. coli, однако некоторые штаммы E. coli могут быть отрицательными по этому признаку.
2. Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за различий в потребностях в питательных веществах.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.

При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица. При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Условия хранения и срок годности

Хранение невскрытого продукта: в плотно закрытом контейнере при 15–25 °C.

Хранение приготовленной среды: при 2–8 °C.

Использовать до даты истечения срока годности, указанной на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде. Это предотвращает образование комков из-за гигроскопичности порошка. Неправильное хранение может привести к образованию комков.

Хранить в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения. После использования контейнер следует плотно закрывать. Рабочие характеристики продукта лучше всего сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Условие из оригинальной карточки: при получении хранить при 15–25 °C.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов и материалов, контактировавших с образцами, необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры: материалы должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими методами лабораторной работы.

Технические характеристики

Сравнительное техническое отличие

В отличие от составов на основе пептонов животного и растительного происхождения, HiCrome агар МакКонки с сорбитолом HiCynth™ содержит химически определённые пептоны HiCynth™ № 4 и HiCynth™ № 5.