HiMedia MCD1340-100G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом

Селективная сухая питательная среда HiMedia MCD1340-100G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом на основе химически определенного пептона HiCynth™. Рекомендуется для селективной изоляции Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и кормов для животных.

Принцип измерения и интерпретация

Среда основана на рецептуре Раппапорта и Хенига. В отличие от классического агара МакКонки, здесь лактоза заменена сорбитолом, что позволяет выявлять энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбитол, образуя бесцветные колонии.

Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбитол, образуют розово-красные колонии: при падении pH среды ниже 6,8 за счет образования кислоты из сорбитола происходит изменение цвета индикатора нейтрального красного.

Для повышения специфичности добавлен индикатор B.C., позволяющий определить наличие фермента β-D-глюкуронидазы, характерного для Escherichia coli. Штаммы, которые одновременно ферментируют сорбитол и обладают активностью β-D-глюкуронидазы, выглядят как сине-фиолетовые колонии. Энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбитол, поэтому образуют бесцветные колонии.

В данной модификации (HiCynth™) животные и растительные пептоны полностью заменены химически определенными пептонами для исключения рисков BSE/TSE (губчатой энцефалопатии).

Функции компонентов:

• Пептоны HiCynth™ №4 и №5: источники углерода, азота, длинноцепочечных аминокислот, витаминов и других питательных веществ.
• Кристаллический фиолетовый и синтетический детергент: подавляют рост большинства грамположительных микроорганизмов.
• Хлорид натрия: поддерживает осмотический баланс.

При добавлении селективной добавки TC (FD147) среда становится более специфичной: теллурит калия подавляет виды Aeromonas и Providencia, а цефиксим ингибирует виды Proteus. Pseudomonas, если присутствуют, образуют бесцветные колонии; для их подтверждения проводится оксидазный тест (результат оценивается через 5–10 с).

Состав

Состав, г/л:

Методика приготовления и использования

1. Растворите 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте в автоклаве при температуре 121 °C (давление ≈0,1 МПа / 15 psi) в течение 15 минут.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным чашкам Петри.
6. При необходимости асептически добавьте один флакон регидратированной селективной добавки TC (FD147) в 495 мл стерильной расплавленной и охлажденной среды перед розливом.

Технические характеристики

• Вес: 100 г
• Физическая форма: порошок
• Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
• Материал упаковки: ПНД (HDPE)
• Происхождение компонентов: химически определенные (HiCynth™)
• Внешний вид: светло-желтый или розовый гомогенный свободнотекущий порошок
• Желирование: плотный гель, сопоставим с 1,35% агаром
• Цвет и прозрачность готовой среды: пурпурно-красный, прозрачный или слегка опалесцирующий гель
• pH водного раствора 5,01% (при 25 °C): 7,1 ± 0,2
• Диапазон pH: 6,90–7,30

Культуральные характеристики

Характеристики учитывают после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч (в некоторых случаях до 48 ч).

(*) — соответствующие номера WDCM.

Область применения и ограничения

Тип образцов

Пищевые продукты. При сборе и обработке образцов следует руководствоваться соответствующими отраслевыми стандартами.

Ограничения

• β-глюкуронидаза присутствует в 97 % штаммов E. coli, однако отдельные штаммы могут быть отрицательными по этому признаку.
• Некоторые виды микроорганизмов могут демонстрировать слабый рост из-за вариаций в питательных потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре 15–25 °C.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Особенности: продукт гигроскопичен; после вскрытия флакон необходимо плотно закрыть во избежание образования комков. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты подлежат безопасному удалению путем автоклавирования и/или сжигания в соответствии с лабораторными протоколами по обращению с инфекционными материалами.