HiMedia MCD1340-100G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом

Питательная среда HiMedia MCD1340-100G HiCrome агар МакКонки с сорбитолом — порошковая химически определённая агаризованная среда для селективного выделения Escherichia coli O157:H7. Среда предназначена для анализа пищевых продуктов и кормов для животных; сорбитол и индикатор B.C. обеспечивают дифференциацию колоний по ферментации сорбитола и активности β-D-глюкуронидазы.

Назначение

Среда рекомендована для селективного выделения Escherichia coli O157:H7 из пищевых продуктов и кормов для животных.

Тип образца: пищевые продукты.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик.

* Химически определённые пептоны.

Происхождение основы: химически определённая, HiCynth™.

Принцип действия и интерпретация результатов

Среда МакКонки с сорбитолом основана на рецептуре, описанной Rappaport и Henig. В составе среды используется сорбитол вместо лактозы. Среда предназначена для выявления энтеропатогенных штаммов Escherichia coli O157:H7, которые ферментируют лактозу, но не ферментируют сорбитол, вследствие чего образуют бесцветные колонии.

Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбитол, образуют розово-красные колонии. Красная окраска обусловлена образованием кислоты из сорбитола, поглощением нейтрального красного и последующим изменением окраски красителя при снижении pH среды ниже 6,8.

Escherichia coli O157:H7 признана причиной геморрагического колита. Для среды МакКонки с сорбитолом сообщались чувствительность 100 % и специфичность 85 % при выявлении Escherichia coli O157:H7; среда рекомендуется как средство скрининга Escherichia coli O157:H7.

Индикатор B.C. добавлен для выявления фермента β-D-глюкуронидазы, специфичного для Escherichia coli. Штаммы Escherichia coli, ферментирующие сорбитол и обладающие β-D-глюкуронидазой, образуют на среде синие или фиолетовые колонии. Энтеропатогенные штаммы Escherichia coli O157:H7 не обладают активностью β-D-глюкуронидазы и не ферментируют сорбитол, поэтому образуют бесцветные колонии.

Основа HiCrome® агар МакКонки с сорбитолом HiCynth™ изготовлена с полной заменой пептонов животного и растительного происхождения на химически определённые пептоны для исключения рисков BSE/TSE, связанных с пептонами животного происхождения.

Пептоны HiCynth™ № 4 и № 5 обеспечивают среду углеродистыми и азотистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами для роста.

Большинство грамположительных организмов подавляется кристаллическим фиолетовым и синтетическим моющим веществом. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Добавление селективной добавки TC делает среду селективной. Теллурит калия селективно выделяет серогруппы и подавляет виды Aeromonas и Providencia. Цефиксим подавляет виды Proteus. При наличии Pseudomonas образует на этой среде бесцветные колонии.

Для подтверждения можно выполнить оксидазный тест с подозрительными колониями; результат следует регистрировать в течение 5–10 с.

Приготовление среды

1. Приготовьте суспензию из 25,06 г порошка в 495 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.
6. При необходимости асептически добавьте регидратированное содержимое одного флакона селективной добавки TC (FD147) в 495 мл стерильной расплавленной охлаждённой среды до разливки в стерильные чашки Петри.

Технические характеристики

• Назначение изделия: питательная среда
• Форма выпуска: порошок
• Масса: 100 г
• Тип продукта: HiCynth™, HiCrome™
• Происхождение основы: химически определённая, HiCynth™
• Тип упаковки: ПЭВП (HDPE)
• Конечный pH при 25 °C: 7,1 ± 0,2
• pH водного раствора: 6,90–7,30
• Концентрация раствора для определения реакции: 5,01 % масс./об.
• Условия хранения сухой среды: 15–25 °C, в плотно закрытом контейнере
• Условия хранения приготовленной среды: 2–8 °C

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от светло-жёлтого до розового цвета.

Гелеобразование

Плотный гель, сопоставимый с 1,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

В чашках Петри образуется гель пурпурно-красного цвета, прозрачный или слегка опалесцирующий.

Реакция

Реакция водного раствора с концентрацией 5,01 % масс./об. при 25 °C: pH 7,1 ± 0,2.

Диапазон pH

6,90–7,30.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после инкубации при 35–37 °C в течение 18–24 ч; при необходимости инкубацию продлевают до 48 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Пробоотбор и обращение с образцами

Для пищевых образцов применяйте соответствующие методы отбора и подготовки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Ограничения применения

1. β-глюкуронидаза присутствует у 97 % штаммов E.coli, однако некоторые штаммы E.coli могут быть отрицательными по этому признаку.
2. Некоторые виды могут демонстрировать слабый рост из-за различий в пищевых потребностях.

Условия эксплуатации и хранения

Храните сухую среду при температуре 15–25 °C в плотно закрытом контейнере, а приготовленную среду — при 2–8 °C. Используйте продукт до истечения срока годности, указанного на этикетке.

После вскрытия флакон необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде для предотвращения образования комков вследствие