HiMedia MCD1083-100G Вторичное обогащение Fraser HiCynth бульон

Сухая питательная среда HiMedia MCD1083-100G Вторичное обогащение Fraser HiCynth бульон для селективного выделения бактерий рода Listeria. Применяется для анализа пищевых продуктов и проб окружающей среды; содержит химически определенные пептоны HiCynth™ для исключения риска заражения BSE/TSE.

Принцип измерения

Среда представляет собой модификацию бульона для вторичного обогащения UVM (USDA-FSIS), разработанную по методике Фрейзера и Спербера и рекомендованную APHA. Она обеспечивает оптимальные условия для роста Listeria.

Определение основано на $\beta$-глюкозидазной активности всех видов Listeria: бактерии гидролизуют эскулин (замещенный глюкозид) до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа из цитрата аммония-железа (III), образуя темно-коричневый или черный комплекс 6,7-дигидрокумарина, что приводит к почернению среды. Цитрат аммония-железа (III) также стимулирует рост L. monocytogenes.

Для подавления сопутствующей микрофлоры используются следующие механизмы:

• Высокая концентрация NaCl и добавление хлорида лития ($\text{LiCl}$) подавляют рост энтерококков.
• Добавление налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина (в составе добавок FD) подавляет рост большинства других сопровождающих бактерий.

Методика приготовления и использования

1. Растворите 57,85 г порошка в 990 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагрейте раствор до полного растворения компонентов.
3. Стерилизуйте среду в автоклаве при температуре 121 °C и давлении $\approx 0,1$ МПа (15 фунтов) в течение 15 минут.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте содержимое одной ампулы добавки Fraser Enrichment Supplement (FD065) или Fraser Selective Supplement (FD125).
6. Тщательно перемешайте и разлейте по стерильным пробиркам или колбам.

Технические характеристики

Состав (г/л)

Общие параметры

Контроль качества

• Внешний вид: однородный свободнотекучий порошок от кремового до желтого цвета.
• Цвет и прозрачность готовой среды:
  • Базовая среда: желтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.
  • После добавления FD065 или FD125: флуоресцентно-желтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка в пробирках.
• Реакция: pH 7,00–7,40 (для 5,78% в/в водного раствора при 25 °C).

Культуральные характеристики

Характеристики определены при использовании добавок Fraser enrichment supplement (FD065) или Fraser Selective Supplement (FD125) после инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 часов.

Условия эксплуатации и хранения

• Хранение порошка: в плотно закрытом контейнере при температуре ниже 30 °C. Из-за гигроскопичности продукта после вскрытия флакон необходимо плотно закрывать во избежание комкования. Хранить в сухом вентилируемом помещении, вдали от источников возгорания и экстремальных температур.
• Хранение готовой среды: при температуре 2–8 °C.
• Срок годности: использовать до даты, указанной на этикетке. Наилучшие показатели эффективности достигаются при использовании в пределах stated expiry period.