HiMedia MCD1083-100G Вторичное обогащение Fraser HiCynth бульон

Питательная среда HiMedia MCD1083-100G Вторичное обогащение Fraser HiCynth бульон с химически определёнными пептонами. Среда предназначена для выявления видов Listeria в пищевых продуктах и образцах окружающей среды и используется после добавления селективной добавки FD065 или FD125.

Назначение

HiMedia MCD1083-100G — основа бульона Fraser для вторичного обогащения при микробиологическом выявлении видов Listeria в пищевых продуктах и образцах окружающей среды. Продукт выпускается в виде сухого порошка массой 100 г и требует добавления регидратированного содержимого одного флакона Fraser Enrichment Supplement FD065 или Fraser Selective Supplement FD125 после стерилизации базовой среды.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных эксплуатационных характеристик. Пептоны являются химически определёнными.

Методика приготовления

1. Суспендируйте 57,85 г сухой среды в 990 мл дистиллированной воды.
2. При необходимости нагревайте до полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. В асептических условиях добавьте регидратированное содержимое одного флакона Fraser Enrichment Supplement FD065 или одного флакона Fraser Selective Supplement FD125.
6. Тщательно перемешайте.
7. Разлейте приготовленную среду в стерильные пробирки или колбы в необходимом объёме.

Принцип действия и интерпретация

Бульон Fraser для вторичного обогащения представляет собой модификацию бульона UVM для вторичного обогащения, применяемого Службой безопасности и контроля пищевых продуктов Министерства сельского хозяйства США (USDA-FSIS). Состав основан на формуляции Fraser и Sperber; среда рекомендована APHA для обнаружения видов Listeria в пищевых продуктах и образцах окружающей среды.

Основа бульона Fraser Secondary Enrichment HiCynth™ отличается заменой пептонов животного происхождения на химически определённые пептоны для исключения риска губчатой энцефалопатии крупного рогатого скота и трансмиссивной губчатой энцефалопатии (BSE/TSE).

HiCynth™ пептон № 1 и HiCynth™ пептон № 5 обеспечивают высокую питательность среды за счёт содержания:

• углеродистых и азотистых соединений;
• аминокислот с длинной углеродной цепью;
• витаминов;
• других необходимых факторов роста.

Фосфаты поддерживают буферную ёмкость среды. Все виды Listeria обладают β-глюкозидазной активностью, которая проявляется почернением среды.

Виды Listeria гидролизуют эскулин — замещённый глюкозид — до глюкозы и эскулетина. Эскулетин взаимодействует с ионами железа, содержащимися в цитрате аммония железа, с образованием чёрно-коричневого комплекса 6,7-дигидроксикумарина. Цитрат аммония железа также усиливает рост Listeria monocytogenes.

Высокая устойчивость Listeria к хлориду натрия используется для подавления роста энтерококков. Хлорид лития также подавляет энтерококки, которые способны гидролизовать эскулин. Рост сопутствующей микрофлоры в значительной степени подавляется добавлением налидиксовой кислоты и гидрохлорида акрифлавина, содержащихся в добавках FD065 и FD125.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид сухой среды: однородный свободно текучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

• Базовая среда: жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка.
• Среда после добавления FD065 или FD125: флуоресцентно-жёлтый прозрачный раствор с небольшим количеством осадка, образующийся в пробирках.

Реакция среды

Реакция 5,78 % м/об водного раствора при 25 °C:

• pH: 7,2 ± 0,2
• Диапазон pH: 7,00–7,40

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют после добавления Fraser Enrichment Supplement FD065 или Fraser Selective Supplement FD125 и инкубации при 35–37 °C в течение 24–48 ч.

Технические характеристики

Хранение и срок годности

• Храните сухую среду при температуре ниже 30 °C в плотно закрытой упаковке.
• Приготовленную среду храните при 2–8 °C.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования из-за гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После использования плотно закрывайте упаковку.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются при использовании в течение установленного срока годности.

Сравнительное техническое отличие

В основе Fraser Secondary Enrichment HiCynth™ используются химически определённые пептоны вместо пептонов животного происхождения; это отличает состав от стандартной основы Fraser Secondary Enrichment Broth.