HiMedia MCD032-100G Жидкая тетратионатная HiCynth среда без йода

Среда HiMedia MCD032-100G Жидкая тетратионатная HiCynth среда без йода производства HiMedia — порошковая основа химически определённой селективной среды для обогащения Salmonella. Применяется при исследовании пищевых и молочных продуктов, а приготовленная среда требует добавления растворов йода и бриллиантового зелёного без автоклавирования.

Назначение

Жидкая тетратионатная HiCynth-среда без йода предназначена для селективного обогащения и выделения сальмонелл, включая Salmonella Typhi, из пищевых, молочных и других санитарно значимых материалов.

Состав

Состав нормирован для обеспечения заданных рабочих характеристик:

Приготовление среды

1. Суспендируйте 46,0 г порошка в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию только до кипения.
3. Не автоклавируйте среду.
4. Охладите основу ниже 45 °C.
5. Добавьте 20 мл раствора йода, приготовленного из 6 г йода и 5 г йодида калия, растворённых в 20 мл дистиллированной воды.
6. Добавьте 10 мл 0,1%-ного раствора бриллиантового зелёного.
7. Тщательно перемешайте.
8. Разлейте среду порциями по 10 мл.

Приготовленную полную среду следует использовать в день приготовления. Стерилизованную основу бульона допускается хранить некоторое время до дальнейшего приготовления. После добавления раствора йода среду нельзя нагревать. Используйте среду сразу после добавления йода.

Из-за присутствия карбоната кальция приготовленная среда образует опалесцирующий раствор с белым осадком.

Принцип действия и интерпретация

Сальмонеллы широко распространены в окружающей среде и обычно присутствуют в меньшем количестве, чем колиформные микроорганизмы. Поэтому для выделения сальмонелл необходимо исследовать относительно большой объём пробы.

Сальмонеллы в пищевых образцах могут получать сублетальные повреждения на различных этапах обработки пищевых продуктов при воздействии низких температур, нагревания, высушивания, излучения и различных химических веществ. Повреждённые клетки способны вызывать порчу продуктов и при попадании в организм — заболевания при благоприятных условиях. Перед количественным определением повреждённые бактерии необходимо восстановить.

В жидкой тетратионатной среде с добавленными йодом и бриллиантовым зелёным формируется тетратионат вследствие взаимодействия йода и йодида калия. В среде растут микроорганизмы, обладающие ферментом тетратионатредуктазой.

Пептон HiCynth™ № 1 служит источником углерода, азота, витаминов и минеральных веществ. Синтетическое моющее вещество подавляет сопутствующие грамположительные микроорганизмы. Селективность среды определяется совместным действием тиосульфата и тетратионата, подавляющих комменсальные колиформные микроорганизмы. Карбонат кальция нейтрализует кислые продукты разложения тетратионата. Бриллиантовый зелёный дополнительно способствует селекции сальмонелл за счёт ингибирования сопутствующих бактерий.

Методика обогащения и выделения

1. Асептически внесите исследуемый материал в жидкую тетратионатную HiCynth-среду с добавленными растворами йода и бриллиантового зелёного.
2. Инкубируйте при 35–37 °C в течение 18–24 ч.
3. После инкубации выполните высев обогащённых культур на селективные плотные среды.
4. Для дальнейшего подтверждения используйте чашки с бриллиантово-зелёным агаром HiCynth™ (MCD016), агаром МакКонки HiCynth™ (MCD081) и висмут-сульфитным агаром HiCynth™ (MCD027).
5. При обогащении и выделении руководствуйтесь утверждёнными стандартными процедурами.

Тип образцов

Тип образцов: пищевые и молочные продукты.

Отбор и обращение с образцами

Для пищевых и молочных образцов применяйте соответствующие методы отбора и пробоподготовки в соответствии с установленными руководствами.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед открыванием контейнера прочитайте этикетку.
• При работе с образцами и культурами используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• Соблюдайте правила надлежащей микробиологической работы.
• При обращении с клиническими образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными руководствами.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Для дальнейшего подтверждения после инкубации выполняйте высев обогащённых культур на чашки с бриллиантово-зелёным агаром (MCD016), агаром МакКонки HiCynth™ (MCD081) и висмут-сульфитным агаром HiCynth™ (MCD027).

Контроль качества

Ожидаемые характеристики среды обеспечиваются при приготовлении и использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Внешний вид порошка: однородный сыпучий порошок от белого до кремового цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды: полная среда с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода представляет собой светло-зелёный опалесцирующий раствор с большим количеством белого осадка; при отстаивании осадок оседает.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики определяют для среды с добавленными растворами бриллиантового зелёного и йода после пересева на агар МакКонки HiCynth™ (MCD081) и обогащения в тетратионатной среде при инкубации 35–37 °C в течение 18–24 ч.

* Соответствующие номера WDCM.

Хранение и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Храните продукт в плотно закрытом контейнере.
• Используйте свежеприготовленную среду.
• Используйте продукт до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• После вскрытия храните продукт в сухом виде, плотно закрывая флакон для предотвращения комкования вследствие гигроскопичности порошка.
• Неправильное хранение может привести к образованию комков.
• Храните продукт в сухом вентилируемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После каждого использования плотно закрывайте контейнер.
• Рабочие характеристики продукта сохраняются лучше всего при использовании в течение установленного срока годности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать автоклавированием и/или сжиганием.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с клиническими образцами, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Назначение изделия: среда
• Масса: 100 г
• Температура хранения: 10–30 °C

Техническое отличие

MCD032-100G поставляется как порошковая основа без йода; для получения полной жидкой тетратионатной среды перед использованием необходимо добавить раствор йода и 0,1%-ный раствор бриллиантового зелёного.