Hi-PCR® белый Spot Syndrome вирус (WSSV) набор для детекции (экстракция и Semi-Q PCR Combo набор) HiMedia MBT183-25PR (25 преп.)

Набор для выделения ДНК и детекции вируса синдрома белых пятен Hi-PCR® HiMedia MBT183-25PR (25 преп.) сочетает экстракцию на спин-колонках и анализ методом ПЦР. Набор предназначен для выявления WSSV и скрининга вирусных патогенов у креветок; полуколичественная ПЦР позволяет оценивать вирусную нагрузку, а результат амплификации подтверждают электрофорезом в агарозном геле.

Назначение и метод анализа

Набор предназначен для выделения ДНК из образцов ткани креветок, детекции вируса синдрома белых пятен (WSSV) и скрининга вирусных патогенов ракообразных. Полуколичественная ПЦР используется для оценки вирусной нагрузки у инфицированных креветок. ПЦР-компонент для WSSV представляет собой качественный набор для обычной ПЦР; амплифицированную мишень выявляют электрофорезом в агарозном геле.

Выделение ДНК

Экстракция проводится методом спин-колоночной очистки:

1. Измельчённый и переваренный образец ткани креветки подвергают лизису протеиназой K в растворе хаотропной соли.
2. После лизиса ДНК связывается с силика-мембраной спин-колонки HiElute Miniprep.
3. Быстрыми этапами промывки удаляют остаточные соли и белковые загрязнения.
4. Очищенную ДНК элюируют предоставляемым буфером для элюции ET.

Амплификация и контроль

Для ПЦР амплифицируют специфические генетические участки с использованием праймеров 146 F2/146 R2; размер ампликона составляет 941 п. н. В описании мишень также указана как вставочный элемент, обнаруживаемый исключительно в образцах креветок. Набор включает внутренний и положительный контроль.