Hi-Temp PCR мастер-микс HiMedia MBT119-100R (100 реакц.)

Hi-Temp PCR мастер-микс HiMedia MBT119-100R (100 реакц.) — готовая к применению смесь для ПЦР с термостабильной ДНК-полимеразой Taq и горячим стартом. Реагент предназначен для амплификации сложных ДНК-матриц и позволяет собирать реакцию при комнатной температуре до термоактивации полимеразы.

Состав и назначение

Мастер-микс представляет собой готовый раствор для амплификации ДНК методом ПЦР. В состав входят термостабильная ДНК-полимераза Hi-Temp, дНТФ, MgCl₂ и реакционные буферы в концентрациях, оптимизированных для амплификации ДНК-матриц.

Предварительное смешивание компонентов сокращает число этапов дозирования при подготовке ПЦР и снижает риск контаминации. Смесь предназначена для воспроизводимой амплификации, в том числе сложных матриц; она поддерживает термостабильный синтез при денатурации сложных мишеней и может применяться в исследованиях геномных мишеней и высокочувствительных анализах.

Принцип горячего старта

ДНК-полимераза Hi-Temp представляет собой комплекс термостабильной ДНК-полимеразы Taq и специфического моноклонального антитела к Taq. До начального этапа денатурации ПЦР антитело связывает полимеразу и удерживает её в неактивном состоянии. Это позволяет собирать реакцию при комнатной температуре.

При термоактивации в течение 1 мин при 94 °C антитела необратимо денатурируют и высвобождают полностью активную немодифицированную ДНК-полимеразу Taq. Горячий старт повышает специфичность амплификации, чувствительность и выход продукта за счёт специфичного и эффективного удлинения праймеров.

Полимераза катализирует полимеризацию нуклеотидов с образованием двуцепочечной ДНК в направлении 5′→3′ в присутствии Mg²⁺; фермент также обладает 5′→3′-экзонуклеазной активностью.

Технические характеристики

• Назначение: амплификация ДНК методом ПЦР
• Формат: готовый к применению мастер-микс
• Компоненты: ДНК-полимераза Hi-Temp, дНТФ, MgCl₂, реакционные буферы
• Количество реакций: 100
• Особенности фермента: горячий старт; термоактивация в течение 1 мин при 94 °C
• Активность ДНК-полимеразы: полимеризация в направлении 5′→3′; 5′→3′-экзонуклеазная активность