Hi-PCR® Salmonella пищевой набор для детекции (Provided с культура среды) HiMedia MBT117-25PR (25 преп.)

Пищевой набор для ПЦР-детекции Hi-PCR® Salmonella пищевой набор для детекции (с культуральной средой) HiMedia MBT117-25PR (25 преп.) — полуколичественный набор для амплификации специфической последовательности ДНК Salmonella spp. Набор предназначен для выявления Salmonella spp. в пищевых пробах по гену iroB длиной 606 п.н. и применяется только для лабораторных исследований вне организма.

Назначение и область применения

Набор предназначен для выявления Salmonella spp. в различных пищевых пробах методом ПЦР. Сальмонеллы — грамотрицательные неспорообразующие бактерии палочковидной формы из семейства Enterobacteriaceae; заражение сальмонеллёзом происходит через загрязнённые пищевые продукты. Традиционное культуральное выявление занимает больше времени, чем ПЦР-анализ.

В состав набора входят внутренний и положительный контроли.

Принцип анализа

Набор предназначен для полуколичественной ПЦР-амплификации специфического гена Salmonella spp. с использованием специфичных праймеров. Амплифицированную целевую последовательность выявляют электрофорезом в агарозном геле, разделяя фрагменты ДНК по размеру.

ПЦР позволяет амплифицировать выбранные участки генетического материала. Реакция включает три этапа:

1. Денатурация: при высокой температуре двухцепочечная ДНК разделяется на одноцепочечные молекулы.
2. Отжиг: праймеры, специфичные к целевой генетической последовательности, связываются с одноцепочечной ДНК.
3. Элонгация: ДНК-полимераза Taq присоединяет дезоксинуклеозидтрифосфаты (dNTP), формируя новые цепи ДНК, комплементарные матричным цепям.

Контроль реакции

Положительный контроль представляет собой реакцию с известной матрицей — целевым патогеном. Его используют для проверки правильности подбора праймеров и условий ПЦР.

Внутренний контроль — это последовательность, амплифицируемая в той же пробирке, что и целевая последовательность, но с использованием других праймеров. Такой подход соответствует мультиплексной ПЦР. Внутренний контроль позволяет обнаружить сбой амплификации, в том числе в случаях, когда целевая последовательность не амплифицировалась.

Технические характеристики