HiPurA® SuperPlant ДНК набор для очистки (для очистка of ДНК from plants rich in polyphenols) HiMedia MB571-50PR (50 преп.)

Набор для очистки ДНК HiPurA® SuperPlant, HiMedia MB571-50PR (50 преп.), предназначен для выделения ДНК из растений с высоким содержанием вторичных метаболитов, включая полифенолы. Набор применяют для исследований в области геномики растений; протокол со спин-колонкой рассчитан на образец свежей растительной ткани массой не более 200 мг.

Назначение

Набор предназначен для выделения и очистки ДНК из свежего растительного материала с высоким содержанием вторичных метаболитов. Специализированная стадия удаления полифенолов позволяет использовать его для пробоподготовки в молекулярно-биологических исследованиях.

Принцип выделения ДНК

Материал измельчают в жидком азоте с буфером экстракции SuperPlant. Содержащийся в буфере CTAB (цетилтриметиламмоний бромид) разрушает растительные клетки и солюбилизирует их содержимое. Хлорофилл и часть денатурированных белков удаляют обработкой смесью хлороформа и изоамилового спирта; органическую фазу отделяют центрифугированием. Поскольку экстракт содержит ДНК и РНК, РНК при необходимости удаляют добавлением РНКазы A. Далее фракцию, прошедшую через фильтр, смешивают с раствором, усиливающим связывание ДНК с колонкой. После пропускания раствора через спин-колонку HiElute Miniprep (с крышкой) выполняют промывки для удаления следовых загрязнителей. Очищенную ДНК элюируют предоставляемым буфером элюции ET.

Методика выделения

1. Возьмите не более 200 мг свежего растительного материала.
2. Нарежьте образец и измельчите его в жидком азоте вместе с буфером экстракции SuperPlant.
3. Обработайте зелёную растительную ткань смесью хлороформа и изоамилового спирта для удаления хлорофилла и части денатурированных белков.
4. Разделите органическую фазу центрифугированием.
5. При необходимости добавьте РНКазу A для удаления РНК из экстракта.
6. Смешайте прошедшую через фильтр фракцию с раствором, усиливающим связывание ДНК с колонкой.
7. Пропустите раствор через спин-колонку HiElute Miniprep с крышкой.
8. Промойте колонку для удаления следовых загрязнителей.
9. Элюируйте очищенную ДНК буфером ET.