HiPurA® SuperPlant ДНК набор для очистки (для очистка of ДНК from plants rich in polyphenols) HiMedia MB571-20PR (20 преп.)

Набор для выделения ДНК HiPurA® SuperPlant, HiMedia MB571-20PR (20 подготовок), предназначен для образцов растений с высоким содержанием полифенолов и предусматривает этап их удаления. Набор применяют для выделения ДНК из свежего растительного материала в исследованиях геномики растений; процедура рассчитана на массу исходного образца не более 200 мг и очистку с помощью спин-колонки.

Область применения

Набор предназначен для выделения и очистки ДНК из растений с высоким содержанием вторичных метаболитов, в том числе полифенолов. Применяется в исследованиях молекулярной биологии и геномики растений.

Принцип выделения ДНК

Измельчение растительного материала в жидком азоте и обработка буфером для экстракции SuperPlant обеспечивают разрушение клеток и переход их содержимого в раствор. Буфер содержит ЦТАБ (цетилтриметиламмоний бромид) — детергент, который разрушает растительные клетки и солюбилизирует их содержимое. Для удаления хлорофилла и части денатурированных белков из зелёной ткани используют экстракцию смесью хлороформа и изоамилового спирта; органическую фазу отделяют центрифугированием. ДНК связывается со спин-колонкой после добавления раствора, усиливающего связывание, а следовые загрязнения удаляются на этапах промывки. Очищенную ДНК элюируют буфером для элюции ET.

Методика выделения

1. Возьмите свежий растительный материал массой не более 200 мг.
2. Нарежьте и измельчите образец в жидком азоте вместе с буфером для экстракции SuperPlant.
3. Обработайте экстракт смесью хлороформа и изоамилового спирта для удаления хлорофилла и части денатурированных белков из зелёной ткани.
4. Отделите органическую фазу центрифугированием.
5. При необходимости удалите РНК из экстракта, содержащего ДНК и РНК, добавив РНКазу A.
6. Смешайте фракцию фильтрата с раствором, усиливающим связывание ДНК с колонкой.
7. Пропустите раствор через закрытую крышкой спин-колонку HiElute Miniprep.
8. Выполните промывки для удаления следовых загрязнений.
9. Элюируйте очищенную ДНК буфером ET.

Технические характеристики

• Максимальная масса исходного влажного образца: 200 мг
• Тип исходного материала: свежая растительная ткань
• Формат очистки: спин-колонка
• Количество подготовок: 20
• Буфер для экстракции SuperPlant: содержит ЦТАБ (цетилтриметиламмоний бромид)
• Удаление РНК: добавлением РНКазы A
• Буфер для элюции: ET