HiMedia MAP225-500G Среда для антибиотического анализа №10

Сухая питательная среда HiMedia MAP225-500G Среда для антибиотического анализа №10 предназначена для приготовления слоя посева при микробиологическом анализе антибиотиков. Среда используется для анализа карбенициллина, колистиметата натрия, сульфата колистина и полимиксина B; приготовленную среду необходимо применять свежей.

Назначение

Среда для антибиотического анализа №10 (Antibiotic Assay Medium H) применяется как агар для слоя посева при микробиологическом анализе:

• карбенициллина;
• колистиметата натрия;
• сульфата колистина;
• полимиксина B.

Среда предназначена для работы с фармацевтическими образцами. Методика применения основана на требованиях USP/IP; состав среды также соответствует IP, USP и CFR и численно идентичен составу, обозначенному Groove и Randall.

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих характеристик. Триптон соответствует панкреатическому перевариванию казеина, соевый пептон — папаиновому перевариванию соевых бобов.

Принцип действия и интерпретация

Среда используется как посевной агар для анализа карбенициллина, колистиметата натрия, сульфата колистина и полимиксина B.

Сочетание триптона и соевого пептона обеспечивает тестовые микроорганизмы азотистыми и углеродистыми соединениями, аминокислотами с длинной цепью, витаминами и другими необходимыми питательными веществами. Натуральные сахара сои усиливают рост микроорганизмов.

Декстроза (глюкоза) служит источником углерода и усиливает рост тестового микроорганизма. Фосфаты повышают буферное действие среды, а хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие.

Полимиксины, как сообщается, медленно диффундируют в агаре, что приводит к образованию зон задержки роста меньшего размера. Поэтому сниженная концентрация агара — 1,2 % — улучшает диффузию полимиксина в среде.

Сообщается, что полисорбат 80 действует синергично с полимиксином на сферопластах Pseudomonas aeruginosa. Полисорбат 80 усиливает проникновение полимиксина к цитоплазматической мембране, поэтому является подходящим компонентом среды для анализа полимиксина.

Методика приготовления среды

1. Приготовьте суспензию из 42,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды, содержащей 10 мл полисорбата 80.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите среду до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте.
6. Разлейте среду в стерильные чашки Петри.

Методика проведения антибиотического анализа

1. Используйте свежеприготовленные чашки со средой.
2. Внесите тестовые микроорганизмы в стерильный посевной агар, предварительно охлаждённый до 40–45 °C.
3. Равномерно распределите посевной агар по поверхности затвердевшего базового агара.
4. Тщательно контролируйте все условия проведения микробиологического анализа.
5. Используйте стандартные питательные среды, поскольку применение стандартной среды является одним из важных условий получения воспроизводимых результатов.

Требования к образцам

Тип образца: фармацевтические образцы.

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим методическим указаниям. После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Технические характеристики

• Назначение: питательная среда для антибиотического анализа.
• Форма выпуска: сухой свободно сыпучий порошок.
• Масса: 500 г.
• Внешний вид: однородный порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета в чашках Петри.
• pH приготовленной среды: 7,10–7,30.
• Конечный pH после стерилизации: 7,2 ± 0,1.
• Температура охлаждения перед разливом: 45–50 °C.
• Температура посевного агара перед нанесением на базовый агар: 40–45 °C.
• Условия стерилизации: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин и давлении 15 фунтов/дюйм² (≈0,103 МПа) либо по валидированному циклу.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации в течение 24 ч.

Для метода IP используют различные температуры инкубации в течение 24 ч. Для метода USP применяют температуру 32–35 °C в течение 24 ч.

По USP

По IP

Контроль качества

Ожидаемые показатели среды:

• Внешний вид: однородный свободно сыпучий порошок кремового или жёлтого цвета.
• Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 1,2%-ным агаровым гелем.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий гель янтарного цвета в чашках Петри.
• pH: 7,10–7,30.

Ограничения применения

• Для анализа необходимо использовать свежеприготовленную среду; применение несвежей среды может привести к ошибочным результатам.
• Отдельные микроорганизмы отличаются требованиями к условиям роста и могут демонстрировать различный характер роста на среде.
• Каждая серия среды проверена на микроорганизмы, указанные в сертификате анализа.
• При использовании среды для конкретного микроорганизма, не указанного в сертификате анализа, рекомендуется провести валидацию с учётом специфических требований пользователя.
• Рабочие характеристики среды ожидаются при применении согласно указаниям на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости, в сухом проветриваемом помещении, защищённом от экстремальных температур и источников воспламенения.
• После вскрытия: плотно закрыть флакон и хранить продукт в сухом состоянии.
• Ограничение: продукт гигроскопичен; при ненадлежащем хранении возможно образование комков.
• После каждого использования ёмкость необходимо герметично закрывать.
• Использовать до даты окончания срока годности, указанной на этикетке.
• Для обеспечения рабочих характеристик рекомендуется использовать продукт в течение установленного срока годности.
• Приготовленную среду следует использовать свежей.

Меры безопасности

Перед вскрытием контейнера прочитайте этикетку. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики и стандартные меры предосторожности в соответствии с установленными методическими указаниями. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Использованные или непригодные препараты необходимо безопасно утилизировать с применением автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов соблюдайте утверждённые лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцами, необходимо обеззараживать и утилизировать