Питательная среда HiMedia MAP101-500G Среда для антибиотического анализа №19 предназначена для микробиологического анализа амфотерицина B и нистатина с использованием Saccharomyces cerevisiae в соответствии с USP/IP. Среда применяется как базовая и посевная агаризованная среда для диффузионного анализа антибиотиков; для получения корректных результатов необходимо использовать свежеприготовленные чашки.

Назначение

Среда рекомендована для микробиологического анализа амфотерицина B и нистатина с использованием Saccharomyces cerevisiae в соответствии с USP/IP.

Тип образца: антибиотики согласно USP и IP (1, 2).

Состав

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения заданных рабочих параметров.

Эквивалент мясного экстракта.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 60,0 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте в автоклаве при давлении 15 фунтов (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
4. Охладите до 45–50 °C.
5. Тщательно перемешайте и разлейте в стерильные чашки Петри.

Принцип действия и интерпретация

Состав среды соответствует USP, IP и CFR (1, 2, 3). Среда используется как посевной агар для анализа противогрибковых препаратов, включая амфотерицин B и нистатин.

Среда предназначена для поддержания культуры и получения инокулята Saccharomyces cerevisiae. Также среда применяется для определения микостатической активности фармацевтических препаратов. Формула среды разработана на основании данных Kirshbam и Arret (4).

Пептон, дрожжевой экстракт и пептон HM B обеспечивают тестовый организм необходимыми питательными веществами, минералами и факторами роста. Декстроза служит дополнительным источником углерода и энергии. Хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды, сохраняя целостность и жизнеспособность клеток.

Среда используется одновременно как базовая и посевная среда для агар-диффузионного анализа антибиотиков, включая амфотерицин B и нистатин.

Обращение с образцами и проведение анализа

Для антибиотического анализа следует использовать свежеприготовленные чашки. Тестовые организмы инокулируют в стерильный посевной агар, предварительно охлаждённый до 40–45 °C, после чего равномерно распределяют по поверхности затвердевшего базового агара.

Для улучшения диффузии антибиотика рекомендуется предварительная диффузия в агаре в течение 20 мин: чашки инкубируют при температуре ниже оптимальной температуры роста микроорганизма. После этого чашки инкубируют для обеспечения роста микроорганизмов.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать в автоклаве перед утилизацией.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, свободно текучий порошок кремового или жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель жёлтого цвета.

Водородный показатель

pH: 6,00–6,20.

Тест на стимулирование роста

Тест на стимулирование роста: согласно USP/IP.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики учитывают после инкубации при 29–31 °C в течение 48 ч.

• Соответствующие номера WDCM.

Ранее классифицировался как Saccharomyces cerevisiae.

Пробоподготовка и ограничения

Свежеприготовленные чашки необходимо использовать для антибиотического анализа; применение несвежих чашек может привести к ошибочным результатам.

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при приготовлении согласно инструкции на этикетке, использовании в пределах срока годности и хранении при рекомендованной температуре.

Условия хранения и срок годности

• Температура хранения: 10–30 °C.
• Условия хранения: плотно закрытый контейнер, сухое проветриваемое помещение.
• Защита при хранении: от экстремальных температур и источников воспламенения.
• Использование: применять свежеприготовленную среду до истечения срока годности, указанного на этикетке.
• После вскрытия контейнер необходимо плотно закрыть и хранить продукт в сухом виде.
• Из-за гигроскопичности продукта при неправильном хранении могут образовываться комки.
• После каждого использования контейнер следует плотно закрывать.
• При получении продукт следует хранить при температуре 10–30 °C.

Требования безопасности

Перед открыванием контейнера ознакомьтесь с этикеткой. При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.

При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики. При работе с образцами необходимо соблюдать стандартные меры предосторожности согласно установленным руководствам. Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Утилизация

Пользователь должен обеспечить безопасную утилизацию использованных или непригодных препаратов среды посредством автоклавирования и/или сжигания.

При утилизации инфекционных материалов необходимо соблюдать установленные лабораторные процедуры. Материалы, контактировавшие с образцом, должны быть обеззаражены и утилизированы в соответствии с действующими лабораторными методиками.

Технические характеристики

• Производитель: HiMedia
• Артикул: MAP101-500G
• Назначение изделия: питательная микробиологическая среда
• Форма выпуска: сухой свободно текучий порошок
• Масса: 500 г
• Назначение анализа: микробиологический анализ амфотерицина B и нистатина
• Тестовый организм: Saccharomyces cerevisiae
• Концентрация среды для приготовления: 60,0 г/1000 мл
• Стерилизация: автоклавирование при 121 °C в течение 15 мин
• Давление при стерилизации: 15 фунтов (≈0,10 МПа)
• Температура охлаждения перед разливом: 45–50 °C
• pH после стерилизации: 6,1 ± 0,1
• Контролируемый диапазон pH: 6,00–6,20
• Температура инкубации при оценке культуральных характеристик: 29–31 °C
• Время инкубации при оценке культуральных характеристик: 48 ч
• Тип применения: базовая и посевная агаризованная среда для агар-диффузионного анализа

Обеззараживание и утилизация после анализа

Загрязнённые материалы перед удалением стерилизуют автоклавированием. Использованные и непригодные препараты среды утилизируют автоклавированием и/или сжиганием; материалы, контактировавшие с образцами, предварительно обеззараживают.