HiMedia MAP009-5KG Жидкая тиогликолевая среда

Питательная микробиологическая среда HiMedia MAP009-5KG Жидкая тиогликолевая среда предназначена для стерилизационных испытаний фармацевтических и биологических препаратов и содержит восстановители для культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов. Среда применяется для выращивания аэробов, анаэробов, грибов и микроаэрофилов, но предназначена для анализа только прозрачных жидкостей или водорастворимых материалов.

Назначение

Жидкая тиогликолевая среда рекомендована для:

• испытаний на стерильность биологических препаратов;
• культивирования аэробных микроорганизмов;
• культивирования анаэробных микроорганизмов;
• культивирования грибов;
• культивирования микроаэрофильных микроорганизмов;
• испытаний на стерильность антибиотиков, биологических препаратов и пищевых продуктов;
• определения фенольного коэффициента;
• определения спороцидного действия дезинфицирующих средств.

Среда предназначена для анализа прозрачных жидкостей или водорастворимых материалов.

Состав

Расчётное количество обезвоженной среды — 29,25 г/л. Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

Методика приготовления

1. Приготовьте суспензию из 29,25 г сухой среды в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов/кв. дюйм (≈0,10 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин или по валидированному циклу стерилизации.
4. Охладите приготовленную среду до 25 °C.
5. Храните приготовленную среду в прохладном тёмном месте, предпочтительно при температуре ниже 25 °C.

Если более верхней трети среды приобрело розово-фиолетовую окраску, среду можно однократно восстановить нагреванием на водяной бане или в свободно проходящем паре до исчезновения розово-фиолетовой окраски.

Принцип действия

Жидкая тиогликолевая среда разработана для быстрого культивирования аэробов и анаэробов за счёт добавления восстановителя и небольшого количества агара.

Моногидрат декстрозы, триптон, дрожжевой экстракт и L-цистин обеспечивают факторы роста, необходимые для размножения бактерий. Тиогликолят натрия и L-цистин действуют как восстановители: удаляя кислород, они снижают окислительно-восстановительный потенциал среды. Это препятствует накоплению пероксидов, токсичных для микроорганизмов.

Сульфгидрильная группа (SH) нейтрализует антибактериальное действие ртутных консервантов и других соединений тяжёлых металлов, которые оказывают бактериостатическое действие на исследуемые материалы.

Повышение содержания кислорода определяется по изменению окраски окислительно-восстановительного индикатора резазурина — с бесцветной или светлой до красной. Небольшое количество агара поддерживает низкий окислительно-восстановительный потенциал и стабилизирует среду.

При проверке стерильности образец, содержащий консерванты, рекомендуется разбавлять этим бульоном для снижения токсичности и усиления роста возможных контаминирующих микроорганизмов.

Тип образца

Фармацевтические образцы для испытаний на стерильность.

Отбор и обращение с образцами

Для фармацевтических образцов применяйте соответствующие методы отбора проб и обработки образцов согласно установленным руководствам.

После использования загрязнённые материалы необходимо стерилизовать автоклавированием перед утилизацией.

Предупреждения и меры предосторожности

• Перед вскрытием контейнера ознакомьтесь с маркировкой.
• При работе используйте защитные перчатки, защитную одежду, средства защиты глаз и лица.
• При обращении с образцами и культурами соблюдайте правила надлежащей микробиологической лабораторной практики.
• При работе с образцами соблюдайте стандартные меры предосторожности согласно действующим руководствам.
• Требования безопасности приведены в соответствующих паспортах безопасности.

Ограничения применения

Среда предназначена для анализа прозрачных жидкостей или водорастворимых материалов.

Рабочие характеристики и оценка

Рабочие характеристики среды обеспечиваются при использовании согласно инструкции на этикетке, в пределах срока годности и при хранении в рекомендованных условиях.

Контроль качества

• Внешний вид: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.
• Цвет и прозрачность приготовленной среды: прозрачный или слегка опалесцирующий раствор светло-соломенного цвета; при выдерживании верхние 10 % или менее объёма среды окрашиваются в розово-фиолетовый цвет.
• pH: 6,90–7,30.

Свойства, стимулирующие рост

Испытание стимулирования роста

Испытание выполняют в соответствии с USP, EP, BP и IP.

Ростовые свойства

При посевной дозе ≤100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C рост микроорганизмов должен быть отчётливо видимым и сопоставимым с ростом, ранее полученным на предварительно испытанной и одобренной партии среды. Для аэробов и анаэробов рост происходит не более чем за 3 сут или за период, не превышающий минимальный срок, установленный методикой.

Испытание на стерильность, стимуляция роста и валидация

Среду испытывают с подходящими штаммами микроорганизмов при посевной дозе ≤100 КОЕ. Инкубацию проводят при 20–25 °C не более 3 сут для бактерий и не более 5 сут для грибов.

Испытание в соответствии с EN ISO 11133:2014/Amd.1:2018(E)

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения к таблицам

• * — соответствующие номера WDCM.
• # — ранее обозначался как Aspergillus niger.
• ^ — ранее обозначался как Pseudomonas aeruginosa.
• ** — ранее обозначался как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.
• ## — ранее обозначался как Micrococcus luteus.
• $ — ранее обозначался как Bacteroides vulgatus.

Хранение и срок годности

• Сухую среду храните при температуре 10–30 °C в плотно закрытом контейнере.
• Приготовленную среду храните при температуре