Жидкая тиогликолевая среда HiMedia MAP009-2.5KG для микробиологического контроля содержит 29,25 г обезвоженной среды на 1 л готового раствора. Жидкая тиогликолевая среда применяется для испытаний фармацевтических препаратов на стерильность и культивирования аэробных, анаэробных, грибковых и микроаэрофильных микроорганизмов; ограничение применения — анализ прозрачных жидкостей или водорастворимых материалов.

Назначение

Среда предназначена для:

• испытаний биологических препаратов и фармацевтических образцов на стерильность;
• культивирования аэробных микроорганизмов;
• культивирования анаэробных микроорганизмов;
• культивирования грибов;
• культивирования микроаэрофильных микроорганизмов;
• определения фенольного коэффициента и спорицидного действия дезинфицирующих средств;
• анализа прозрачных жидкостей и водорастворимых материалов.

Методики применения соответствуют требованиям фармакопей USP, EP, BP и IP, а также рекомендациям AOAC и ISO, указанным для испытаний на стерильность антибиотиков, биологических препаратов и пищевых продуктов.

Состав

Содержание компонентов приведено для 1 л готовой среды.

Формула скорректирована и стандартизирована для обеспечения установленных рабочих характеристик среды.

Принцип действия

Жидкая тиогликолевая среда разработана для быстрого культивирования аэробных и анаэробных микроорганизмов за счёт введения восстановителя и небольшого количества агара.

Моногидрат декстрозы, триптон, дрожжевой экстракт и L-цистин обеспечивают факторы роста, необходимые для размножения бактерий. Тиогликолят натрия и L-цистин действуют как восстановители: удаляют кислород и снижают окислительно-восстановительный потенциал среды. Это препятствует накоплению пероксидов, токсичных для микроорганизмов.

Тиольная группа нейтрализует антибактериальное действие ртутных консервантов и других соединений тяжёлых металлов, которые оказывают бактериостатическое действие на исследуемые материалы.

Увеличение содержания кислорода определяется по изменению окраски окислительно-восстановительного индикатора резазурина — от красной окраски. Небольшое количество агара помогает поддерживать низкий окислительно-восстановительный потенциал и стабилизирует среду.

При испытаниях на стерильность образец, содержащий консерванты, рекомендуется разбавлять этим бульоном, чтобы снизить токсичность консервантов и повысить вероятность роста присутствующих загрязняющих микроорганизмов.

Методика приготовления

1. Взвесьте 29,25 г обезвоженной среды, что соответствует количеству среды на 1 л готового раствора.
2. Суспендируйте навеску в 1000 мл очищенной или дистиллированной воды.
3. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (≈0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин либо используйте валидированный цикл стерилизации.
5. Охладите приготовленную среду до 25 °C.
6. Храните среду в прохладном тёмном месте, предпочтительно при температуре ниже 25 °C.

Восстановление окраски среды

Если более верхней трети объёма среды приобрело розово-фиолетовую окраску, среду допускается однократно восстановить нагреванием на водяной бане или в свободно проходящем паре до исчезновения розово-фиолетовой окраски.

Объект исследования и обращение с образцами

Тип образца

Фармацевтические образцы, предназначенные для испытаний на стерильность.

Отбор и подготовка образцов

Для фармацевтических образцов необходимо применять соответствующие методы отбора и обработки проб согласно действующим руководствам.

После использования загрязнённые материалы перед утилизацией необходимо стерилизовать автоклавированием.

Технические характеристики

• Наименование: жидкая тиогликолевая среда
• Артикул: MAP009-2.5KG
• Назначение изделия: питательная среда
• Масса: 2,5 кг
• Дозировка обезвоженной среды: 29,25 г/л
• Объём воды для приготовления: 1000 мл на 29,25 г среды
• pH после стерилизации: 7,1 ± 0,2
• Контрольный диапазон pH: 6,90–7,30
• Форма выпуска: однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета

Контроль качества

Внешний вид

Однородный сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Прозрачный раствор светло-соломенного цвета, от прозрачного до слегка опалесцирующего; при выдерживании верхние 10 % или менее объёма среды могут приобретать розово-фиолетовую окраску.

pH

Диапазон pH: 6,90–7,30.

Ростовые свойства

Испытание на ростовые свойства

Испытание проводят в соответствии с требованиями USP, EP, BP и IP.

Требования к росту

При инокуляции не более 100 КОЕ и инкубации при 30–35 °C рост микроорганизмов должен быть отчётливо видимым и сопоставимым с результатом, ранее полученным для испытанной и одобренной партии среды. Рост должен наблюдаться не позднее минимального периода времени, установленного для конкретного микроорганизма, но не более чем за 3 сут для аэробов и анаэробов.

Испытание на стерильность, стимуляция роста и валидация

Среду испытывают с использованием подходящих штаммов микроорганизмов при инокуляции не более 100 КОЕ. Инкубацию проводят при 20–25 °C не более 3 сут для бактерий и не более 5 сут для грибов.

Испытание по EN ISO 11133:2014/Amd.1:2018(E)

Культуральные характеристики оценивают после инкубации при 36–38 °C в течение 18–24 ч.

Обозначения к таблице

• * — соответствующие номера WDCM.

• — ранее известен как Aspergillus niger.

• ^ — ранее известен как Pseudomonas aeruginosa.
• ** — ранее известен как Bacillus subtilis subsp. spizizenii.

• — ранее известен как *