Среда для испытаний антибиотиков F (соответствует Британской фармакопеи) HiMedia M923B-500G (уп/500 гр)

Питательная микробиологическая среда для испытаний антибиотиков F HiMedia M923B-500G (уп/500 г) представляет собой сухой порошок для приготовления агаризованной среды. Среда применяется для микробиологического определения амфотерицина B и нистатина с использованием Saccharomyces cerevisiae и Candida tropicalis; рабочий pH после стерилизации составляет 6,0 ± 0,1.

Назначение

Среда предназначена для микробиологического анализа амфотерицина B и нистатина. Формула разработана в соответствии с Британской фармакопеей и рассчитана на проведение антибиотикологических испытаний с определением концентрации антибиотика по зоне подавления роста тест-организма.

Состав

Состав, г/л:

Формула скорректирована и стандартизирована для соответствия рабочим параметрам.

При анализе амфотерицина B необходимо отрегулировать pH до 6,1 ± 0,1.

Приготовление среды

1. Суспендируйте 59,09 г сухого порошка в 1000 мл R-воды, очищенной или дистиллированной воды.
2. Нагрейте суспензию до кипения для полного растворения среды.
3. Разлейте приготовленную среду по подходящим ёмкостям.
4. Стерилизуйте автоклавированием при давлении 15 фунтов (ориентировочно 0,103 МПа) и температуре 121 °C в течение 15 мин.
5. Отрегулируйте pH среды свежеприготовленным буферным раствором, рекомендованным Британской фармакопеей для анализируемого антибиотика.

Для антибиотикологических испытаний рекомендуется использовать свежеприготовленные чашки.

Принцип измерения и интерпретация

Методика антибиотикологических испытаний основана на определении зоны подавления роста тест-организма. Тест-организмы вносят в стерильный посевной агар, охлаждённый до 40–45 °C, после чего равномерно распределяют посевной материал по поверхности затвердевшего основного агара.

После инкубации концентрацию анализируемого антибиотика определяют по диаметру или величине полученной зоны подавления роста в сравнении с зоной, сформированной референтным стандартным антибиотиком. Все условия микробиологического анализа должны тщательно контролироваться. Использование стандартизированных питательных сред является одним из важных условий получения воспроизводимых результатов.

Среда F предназначена для микробиологического анализа нистатина и амфотерицина B с применением Saccharomyces cerevisiae и Candida tropicalis.

Функции компонентов среды:

• пептон, дрожжевой экстракт и мясной экстракт обеспечивают тест-организмы необходимыми питательными веществами, минеральными компонентами и факторами роста;
• моногидрат глюкозы служит дополнительным источником углерода и энергии;
• хлорид натрия поддерживает осмотическое равновесие среды, жизнеспособность и целостность клеток;
• повышенная концентрация агара формирует твёрдую основу для роста колоний и регулирует диффузию антибиотиков.

Методика проведения анализа

1. Подготовьте среду согласно процедуре приготовления и разлейте её для формирования основного агарового слоя.
2. Приготовьте стерильный посевной агар и охладите его до 40–45 °C.
3. Внесите тест-организмы в посевной агар.
4. Равномерно распределите посевной материал по поверхности затвердевшего основного агара.
5. Проведите инкубацию при температуре, установленной для соответствующего тест-организма и антибиотика.
6. Определите концентрацию анализируемого антибиотика по зоне подавления роста и сопоставьте результат с зоной, полученной для стандартного антибиотика.

Контроль качества

Внешний вид

Внешний вид: однородный, сыпучий порошок от кремового до жёлтого цвета.

Гелеобразование

Гелеобразование: плотный гель, сопоставимый с 2,35%-ным агаровым гелем.

Цвет и прозрачность приготовленной среды

Цвет и прозрачность приготовленной среды: в чашках Петри образуется прозрачный или слегка опалесцирующий гель светло-жёлтого цвета.

Реакция среды

Реакция: для водного раствора с концентрацией 5,91 % мас./об.

pH: 6,0 ± 0,1.

Диапазон pH

Диапазон pH: 5,90–6,10.

Культуральные характеристики

Культуральные характеристики оценивают после инкубации в течение 18–24 ч при указанной температуре. При анализе амфотерицина B необходимо отрегулировать pH до 6,0–6,20.

Технические характеристики

• Назначение изделия: среда
• Производитель: HiMedia
• Фасовка: 500 г
• Сертификат: ФСЗ 2009/03707

Хранение и срок годности

• Температура хранения: ниже 30 °C
• Условия хранения: в плотно закрытой ёмкости
• Использование: применять свежеприготовленную среду
• Срок использования: до даты истечения срока годности, указанной на этикетке

Особенности применения

Среда предназначена для анализа амфотерицина B и нистатина; при работе с амфотерицином B требуется отдельная корректировка pH в зависимости от указанной процедуры. Для анализа необходимо использовать свежеприготовленные чашки и контролировать состав среды, температуру посевного агара, режим инкубации и условия диффузии антибиотика.